Tespit Sütü için Melamin Hızlı ELISA Süt Test Kiti 96Wells / Kit ISO9001

Tespit Sütü için Melamin ELISA Test Kiti 96Wells/Kit ISO9001

 

1. İlke

Bu test kiti, numunede Melamin tespiti için indirekt rekabetçi enzim immunoassay'e dayanmaktadır.Kuplaj antijeni, mikro kuyulu şeritler üzerinde önceden kaplanmıştır.Numunedeki Melamin ve mikro-kuyu şeritleri üzerine önceden kaplanmış birleştirme antijenleri, anti-Melamin antikorları için rekabet eder.Enzim konjugatının eklenmesinden sonra, renklendirme için TMB substratı eklenir.Test numunesinin optik yoğunluk (OD) değeri, numunedeki Melamin konsantrasyonu ile negatif bir korelasyona sahiptir.Bu değer standart eğri ile karşılaştırılır ve ardından Melamin konsantrasyonu elde edilir.

 

 

2.Süt Test KitiBileşenler

1	Mikro kuyu şeritleri	8 çıkarılabilir 12 şerit her kuyu
2	6× standart solüsyon (her biri 1 mL)	0ppb	0.5ppb
		1.5ppb	4.5ppb
		13.5ppb	40.5ppb
3	Spiking standart çözümü	1 ppm	1 ml
4	enzim konjugatı	7ml	kırmızı şapka
5	Antikor çalışma çözümü	7ml	Mavi şapka
6	Substrat A	7ml	Beyaz şapka
7	SubstratB	7ml	siyah şapka
8	Çözümü durdur	7ml	sarı bere
9	10x numune çıkarma A solüsyonu	50ml	şeffaf kapak
10	20x numune alma B solüsyonu	50ml	Mavi şapka
11	20× konsantre yıkama tamponu	15ml	Beyaz şapka

 

3. Teknik özellikler

Hassasiyet: 0.5ppb

İnkübatör sıcaklığı: 25 ℃

İnkübatör süresi: 30dk~15dk

Algılama sınırı:

Tereyağı, şeker, peynir 10ppb

Çapraz reaksiyon oranı:

Melamin %100

Geri Dönüşüm Oranı:

Tereyağı %90±25

Şeker, peynir %95±25

 

4. Gereken ancak sağlanmayan malzemeler

1) Ekipmanlar: mikroplaka okuyucu, yazıcı, vorteks, santrifüj, ölçüm pipetleri, terazi (0,01 g karşılıklı duyarlılık), 70°C su banyosu;

2) Mikropipetçiler: tek kanallı 20~200 µL, 100~1000 µL;ve çok kanallı 30～300 μl;

 

5. Örnek ön işlem

Talimatlar (Aşağıdaki hususlar ön işlemden önce ele alınmalıdır)

1) Deneyler için sadece tek kullanımlık uçlar kullanılabilir ve farklı reaktifler için kullanıldığında uçlar değiştirilmelidir;

2) Deney sonuçlarını bozan kirlenmeyi önlemek için deneyden önce her deney ekipmanı temiz olmalı ve gerekirse tekrar temizlenmelidir.

Çözüm hazırlama

1) Numune çıkarma Bir çözelti

10x örnek ekstraksiyon A solüsyonunu 1:9 oranında deiyonize su ile seyreltin;

2) Numune çıkarma B solüsyonu

20x örnek ekstraksiyon B solüsyonunu 1:19'da deiyonize su ile seyreltin.

 

5.1 Tereyağı

1) 1 g taze tereyağını 50 ml santrifüj tüpüne alın, 5 ml Numune Çıkarma A solüsyonu ekleyin, 70°C su banyosunda 5 dakika inkübe edin, vorteksleyin ve 5 dakika çalkalayın, oda sıcaklığında 4000 dev/dak'nın üzerinde 5 dakika santrifüjleyin;

2) Analiz için 50ul alt tabaka sıvısı alın

Örnek seyreltme katı: 5

5.2 Şeker, peynir

1) 50 ml santrifüj tüpüne 1 g taze numune alın, 5 ml Numune Çıkarma B solüsyonu ekleyin, 70°C su banyosunda 5 dakika inkübe edin, vorteksleyin ve 5 dakika çalkalayın, oda sıcaklığında 4000 dev/dak'nın üzerinde 5 dakika santrifüjleyin;

2) Analiz için 50ul alt tabaka sıvısı alın

Örnek seyreltme katı: 5

 

6. ELISA prosedürleri

6.1 Talimatlar

1 Tüm reaktifleri ve mikro kuyulu stripleri oda sıcaklığına (20-25 ℃) getirin.

2 Kullanımdan hemen sonra tüm reaktifleri 2-8 ℃'ye getirin.

3 ELISA analizinin tekrar üretilebilirliği büyük ölçüde plaka yıkamanın tutarlılığına bağlıdır.Plaka yıkamanın doğru çalışması ELISA prosedürlerinde kilit noktadır.

4 Sabit sıcaklıklarda inkübasyon için, tüm numuneler ve reaktifler ışığa maruz kalmamalı ve her bir mikroplaka kapak membranı ile kapatılmalıdır.

6.2 Çalıştırma prosedürleri

1)Test kitini en az 30 dakika oda sıcaklığına (20-25 ℃) getirin, her reaktifin kullanımdan önce eşit şekilde çalkalanması gerektiğini unutmayın;gerekli mikro-kuyu şeritlerini plaka çerçevelerine yerleştirin.Kullanılmayan mikroplakayı yeniden mühürleyin, 2-8 ℃'de saklayın, dondurmayın.

2)Çözelti hazırlama: 15 mL 20Xkonsantre yıkama tamponunu deiyonize suyla kullanım için 300 mL'ye seyreltin;

3)Numaralandırma: numunelere ve standart solüsyona göre mikro kuyucukları numaralandırın;her numune ve standart solüsyon iki kopya halinde yapılmalıdır;konumlarını kaydedin.

4)Çift kuyucukları ayırmak için 50µL numune/standart solüsyon ekleyin, ardından 50µL enzim konjugatı ekleyin, ardından her kuyucuğa 50µL antikor çalışma solüsyonu ekleyin, uygun şekilde çalkalayın, mikroplakayı kapak membranı ile kapatın ve 25°C'de 30 dakika inkübe edin;

5)Kuyulardan sıvıyı boşaltın, mikroplakayı seyreltilmiş yıkama tamponuyla 250 µL/kuyuda 5-6 kez yıkayın.Her seferinde seyreltilmiş yıkama tamponu ile kuyucuğu 15-30 saniye ıslatın ve ardından emici kağıt üzerinde kurutun (çırptıktan sonra kabarcıklar varsa temiz uçlarla kesin).

6)Renklendirme: Her kuyucuğa 50 µL substrat A, ardından 50 µL substrat B ekleyin.Plakayı elle sallayarak hafifçe karıştırın ve renklendirme için karanlıkta 25 °C'de 15 dakika inkübe edin;

7)Belirleme: her kuyucuğa 50µL stop solüsyonu ekleyin.Plakayı elle sallayarak hafifçe karıştırın.Her kuyunun OD değerini belirlemek için mikroplaka okuyucunun dalga boyunu 450nm'ye ayarlayın.(5 dakika içinde çift dalga boyu 450/630 nm'de OD değerini okumanızı öneririz).

 

7. Sonuç değerlendirmesi

Sonuçları değerlendirmenin iki yöntemi vardır;birincisi kaba muhakeme, ikincisi ise nicel tespittir.Numunenin OD değerinin Melamin içeriği ile negatif bir korelasyona sahip olduğuna dikkat edin.

7.1 Niteliksel belirleme

Konsantrasyon aralığı (ng/mL), test numunesinin ortalama OD değeri ile standart çözeltininki karşılaştırılarak elde edilebilir.NumuneninⅠ OD değerinin 0,3 ve numuneninⅡ değerinin 1,0 olduğunu varsayarsak, standart solüsyonların OD değeri: 0ppb için 2,043, 0,5ppb için 1,604, 1,5ppb için 1,101, 4,5ppb için 0,512, 13,5ppb için 0,161 , 40,5 ppb için 0,055, buna göre numuneⅠ'nin konsantrasyon aralığı 4,5 ila 13,5 ppb'dir ve numune Ⅱ'ninki 1,5 ila 4,5 ppb'dir.

7.2 Nicel belirleme

Absorbans değerlerinin ortalama değerleri, test örneğinin ve standart çözeltinin ortalama OD değerinin (B) yüzdesinin ilk standart çözeltinin (0 standart) OD değerine (B0) bölünmesi ve ardından 100 ile çarpılmasına eşdeğerdir. %, yani

 

Absorbans değerinin yüzdesi =	B	×100%
	B0

 

B—test numunesinin veya standart solüsyonun ortalama (çift kuyu) OD değeri

B0—0 ng/mL standart solüsyonun ortalama OD değeri

Sırasıyla Y ve X ekseni olarak standart solüsyonların absorpsiyon yüzdelerini ve Melamin standart solüsyonlarının semilogaritmik değerlerini (ng/mL) içeren standart eğriyi çizin.Absorpsiyon yüzdesini standart eğriye dahil ederek standart eğriden test örneğinin karşılık gelen konsantrasyonunu okuyun.Ortaya çıkan değer daha sonra karşılık gelen seyreltme katıyla çarpılarak nihai olarak numunedeki Melamin konsantrasyonu elde edilir.

 

8. Önlemler

1)25°C'nin altındaki oda sıcaklığı veya reaktiflerin sıcaklığı ve test numunelerinin oda sıcaklığına (20-25°C) döndürülmemesi, daha düşük bir standart OD değerine yol açacaktır.

2)Yıkama işleminde mikroplakanın kuruluğuna, doğrusal olmayan standart eğriler ve istenmeyen tekrarlanabilirlik gibi durumlar eşlik edecektir;Bu nedenle, yıkandıktan hemen sonra bir sonraki adıma geçin.

3)Eşit şekilde karıştırın, aksi takdirde istenmeyen tekrarlanabilirlik olacaktır.

4)Durdurma solüsyonu 2 M sülfürik asit solüsyonudur, cilt ile temasından kaçınınız.

5)Son kullanma tarihi geçen kiti kullanmayın.Kitlerden seyreltilmiş veya tağşiş edilmiş reaktiflerin kullanılması, hassasiyette ve saptanan OD değerlerinde değişikliklere yol açacaktır.Kullanılacak farklı lot numaralı kitlerdeki reaktifleri değiştirmeyin.

6)Kullanılmayan mikroplakayı tekrar kapatmak için otomatik kapanan bir torbaya koyun.Standart madde ve renksiz renk oluşturucu ışığa duyarlıdır ve bu nedenle doğrudan ışığa maruz kalamazlar.

7)Renklendirme solüsyonunu, bu solüsyonun dejenerasyonunu gösteren herhangi bir renkle atın.Standart solüsyon 1(0 ppb)'nin 0,5'ten düşük tespit değeri, onun dejenerasyonunu gösterir.

8)Optimum reaksiyon sıcaklığı 25 ℃'dir ve çok yüksek veya düşük sıcaklıklar, algılama hassasiyetinde ve OD değerlerinde değişikliklere neden olur.

 

9. Saklama ve son kullanma tarihi

Depolama: 2-8 ℃'de saklanır, dondurulmaz.

Son kullanma tarihi: 12 ay;üretim tarihi kutunun üzerindedir

Not: Mikroplakanın Vakum paketinde sızıntı varsa, kullanım hala geçerlidir, test sonucunu etkilemez, rahat kullanın.

 

 

Q1: göndermeniz ne kadar sürer?
A1: Genellikle 7 iş günü içinde gönderilir.

 

S2: OEM/ODM'yi destekliyor musunuz?
A2: desteklenebilir.Özel ihtiyaçlarınıza ve belirli miktarlara göre özelleştirebiliriz.

 

S3: Fabrikanız kalite kontrol açısından ne durumda?
A3: ISO9001 sertifikasına ve ISO13485 sertifikasına sahibiz, şu ana kadar tüm üretim süreci, standart kurallarımız var, hükümetin ilgili davranış ve yasalarına uyuyoruz.

 

S4: Satış sonrası servis garantisi var mı?
A4: Profesyonel çevrimiçi teknik satış sonrası hizmet sağlıyoruz.Ürün deney sırasında başarısız olursa, sağlayabiliriz
telefon, video ve diğer formlar aracılığıyla birebir rehberlik.

 

S5: Minimum sipariş miktarınız nedir?
A5: 1 Kit.

 

Q6: nakliye yöntemi nedir?
Y6: Ekspres (FEDEX, UPS, DHL, EMS, vb.) veya hava ve kara yoluyla gönderilebilir. Lütfen sipariş vermeden önce bizimle onaylayın.