Kuş Gribi Virüsü ELISA Anti-Vücut Test Kiti Teşhis 96Wells/Kit ISO9001

Avian influenza Virüs Antikor Teşhis ELISA Kiti 96Wells/Kit ISO9001

 

1. Giriş

 

Gerçek kuş gribi veya Avrupa kuş gribi olarak da bilinen kuş gribi, asemptomatik zehirlenme ve akut bulaşıcı ölümle karakterize A tipi kuş gribi virüsünün (AIV) neden olduğu akut ve oldukça ölümcül bir bulaşıcı hastalıktır.

Bu ELISA kiti, tavuk, ördek, hindi, bıldırcın, beç tavuğu, kaz ve diğer kümes hayvanlarının serum, plazma veya yumurta sarısındaki kuş gribi virüsü tip A antikorlarını tespit etmek için kullanılır ve bağışıklık etkisinin değerlendirilmesi ve yardımcı teşhis için kullanılabilir..

 

2. İlke

 

Bu kit, AIV antijeni önceden kaplanmış mikroplakalar, antikor çalışma solüsyonu, enzim konjugatları vb.'den oluşur. Rekabetçi ELISA'yı (ELISA'yı bloke eder) benimser.Testi çalıştırırken, önceden kaplanmış mikroplaka kuyularına seyreltilmiş numune ve antikor çalışma solüsyonu ekleyin.Örnekte AIV antikoru varsa, antikor çalışma solüsyonunun mikroplaka üzerinde önceden kaplanmış AIV antijenine bağlanmasını önleyecektir.Sonuç olarak aşağıdaki adımlarda renk reaksiyonu olmaz, aksi halde renk reaksiyonu olur.Numunenin renk derinliği, numunedeki spesifik antikor içeriği ile negatif olarak ilişkilidir.Stop solüsyonu eklendikten sonra renk sarıya döndü.Her reaksiyon kuyusunun absorbans değeri, bir mikroplaka okuyucu ile 450 nm'de ölçülmüştür.Daha sonra örnekte kuş gribi virüsü (AIV) tip A antikorlarının olup olmadığını bilebiliriz.

 

3. Bileşenler

 

kod	İsim	1X96T	2X96T
1	AIV antijen kaplı mikroplaka	96T×1	96T×2
2	Enzim eşleniği (kırmızı kapak)	11ml×1	11ml×2
3	Antikor çalışma solüsyonu (mavi kapak)	5.5ml×1	11ml×1
4	20x Konsantre yıkama tamponu	40ml×1	40ml×1
5	Substrat A (beyaz kapak)	6ml×1	11ml×1
6	Yüzey B (siyah kapak)	6ml×1	11ml×1
7	Durdurma çözümü (sarı kapak)	6ml×1	11ml×1
8	Pozitif kontrol (kırmızı kapak)	1.0 ml×1	1,5 ml×1
9	Negatif kontrol (yeşil kapak)	1.0 ml×1	1,5 ml×1
10	Yapışkan Folyo	1 parça	2 parça
11	Talimat	1 parça	1 parça

 

 

4. Gerekli ancak sağlanmayan malzemeler

 

1) mikroplaka okuyucu (450/630 nm dalga boyları dahil).

2) Ayarlanabilir Mikropipetler

3) 37 ℃ sabit sıcaklık ekipmanı

 

5. Numune Hazırlama

 

1) 20x Konsantre Yıkama Tamponunu kullanmadan önce oda sıcaklığına (yaklaşık 25°C) getirin, çöken tuzları çözmek için sallayın ve ardından 20x distile veya deiyonize su ile seyreltin.

2) Serum/plazma: Hayvanlardan tam kan alınır ve geleneksel yöntemlere göre serum veya plazma alınır.Serum/plazma, hemoliz ve kirlilik olmadan berraklaştırılmalıdır.Örnekler kısa süreli saklama için (1 hafta içinde) 2~8°C'de ve uzun süreli saklama için -20°C'de saklanabilir.

Yumurta sarısı: 2 ml taze yumurta sarısı alın, 2 ml fizyolojik salin ekleyin, iyice çalkalayın, 3000r/dk'da 15 dakika santrifüjleyin ve süpernatantı numune olarak alın.

3) Serum, plazma veya hazırlanmış yumurta sarısı numunelerini seyreltilmiş yıkama tamponu ile 5 kat seyreltin (örn. 10ul numuneyi 40ul seyreltilmiş yıkama tamponuna ekleyin ve iyice karıştırın).Pozitif ve negatif kontroller seyreltme gerektirmez.

 

6. Test prosedürü

 

1) Kullanmadan önce kiti 30 dakika oda sıcaklığına getirin.

2) Gerekli sayıda mikroplaka kuyusu alın, 2 negatif kontrol kuyusu ve 2 pozitif kontrol kuyusu ayarlayın, kullanılmayan kuyuları kapatın ve mümkün olan en kısa sürede 2~8°C'de saklayın.

3) Negatif kontrole negatif kontrol eklenir, 50ul/kuyucuk, pozitif kontrole pozitif kontrol eklenir, 50ul/kuyuya;numune kuyusu seyreltilmiş numuneye 50ul/oyuk eklenir;

4) Her kuyuya 50ul/kuyucuk antikor çalışma solüsyonu ekleyin.İyice karıştırın ve 37°C'de 30 dakika inkübe edin.

5) Kuyucuklardaki sıvıyı boşaltın, tüm kuyuları yıkama solüsyonu ile doldurun, 30 saniye inkübe edin ve atın.Yıkama işlemini yukarıdaki gibi 5 kez tekrarlayın ve hafifçe kurulayın.

6) Her bir oyuğa 100ul/oyuk enzim konjugatı ekleyin.37°C'de 30 dakika inkübe edin.

7) Adım 5) yıkayın.

8) Her kuyuya Substrat A: 50ul/kuyucuk ekleyin, ardından Substrat B: 50ul/kuyucuk ekleyin, iyice karıştırın ve karanlıkta 15 dakika 37°C'de inkübe edin.

9) Durdurma solüsyonu ekleyin: oyuk başına 50ul/oyuk, iyice karıştırın ve her kuyunun A değerini 450nm'de ölçmek için ELISA Reader'ı kullanın (630nm referanstır).

 

7. Sonuçlar

 

1) Normal şartlar altında, negatif kontrol kuyusunun A değeri 1.0'dan büyük veya ona eşittir;

2) Normal şartlar altında, pozitif kontrol kuyusunun A değeri ≤ negatif kontrol kuyusunun A değeri × %50;

3) PI (engelleme oranı) = (1-numune değeri/negatif kontrol ortalaması) X %100,PI ≥ %50: pozitif;PI < %50: negatif

4) Bağışıklanmamış sürüler: Pozitif sonuçlar, klinik verilerle birlikte analiz edilmesi gereken enfeksiyona sahip olabilir.

5) İmmün sürüler: Bu sırada numunelerin antikor seviyesini izleyin ve kaydedin ve sonuçlara göre antikor seviyelerinin dağılımını ve sürülerin bağışıklık durumundaki değişiklikleri analiz edin.

 

8. Kısıtlamalar

 

Bu kit, AIV antikorlarını yalnızca kalitatif olarak saptayabilir.Güçlü, orta ve zayıf antikor seviyeleri, PI değerine göre kabaca değerlendirildi.

 

9. Notlar

 

1) Çalışma sırasında eldiven ve iş elbisesi giyin, dezenfeksiyon ve izolasyon sistemini kesinlikle uygulayın.Çeşitli deney atıkları kirletici olarak ele alınmalıdır

2) Durdurma çözümü aşındırıcıdır.Cilt ve giysilerle temasından kaçının.Temas oluşursa, musluk suyuyla durulayın.

3) Buzdolabından çıkarılan mikroplakalar oda sıcaklığında kuruyana kadar dengelenmeli ve kullanılmayan mikroplakalar kurutucu madde ile kapatılmalıdır.

4) Yıkama sıvısının düşük sıcaklıkta kristalleşmesi kolaydır ve kullanıldığında oda sıcaklığında çözülür.

5) Kuyusuz enzimlerin yıkanmamasını önlemek için her kuyucuğa yeterince yıkama tamponu ekleyin

6) Test numuneleri taze olmalıdır.

7) Test sonuçlarının belirlenmesi, bir ELISA okuyucusuna dayanmalıdır.

8) Farklı partilerden reaktifleri karıştırmayın.

 

Özellikler: 5X96, 2X96, 1X96 delik/kit.

Geçerlilik: 12 ay.

Depolama: 2-8 ℃, ışıktan uzak tutun.

Mikroplakaları paketini açtıktan sonra 2 ay boyunca 2-8°C'de nemden uzakta saklayın.

 

 

S1: Göndermeniz ne kadar sürer?
A1: Genellikle 7 iş günü içinde kargoya verilir.

 

Q2: OEM/ODM'yi destekliyor musunuz?
A2: desteklenebilir.Özel ihtiyaçlarınıza ve belirli miktarlara göre özelleştirebiliriz.

 

Q3: Fabrikanız kalite kontrol açısından nasıl gidiyor?
A3: ISO9001 sertifikasına ve ISO13485 sertifikasına sahibiz, şimdiye kadar tüm üretim süreci, standart kurallarımız var, hükümetin ilgili davranış ve yasalarına uyuyoruz.

 

S4: Satış sonrası servis garantili mi?
A4: Profesyonel çevrimiçi teknik satış sonrası hizmet sunuyoruz.Ürün deney sırasında başarısız olursa, sağlayabiliriz
telefon, video ve diğer formlar aracılığıyla bire bir rehberlik.

 

S5: Minimum sipariş miktarınız nedir?
A5: 1Kit.

 

S6: Nakliye yöntemi nedir?
A6: Ekspres (FEDEX, UPS, DHL, EMS, vb.) veya hava ve kara yoluyla gönderilebilir. Lütfen sipariş vermeden önce bizimle onaylayın.