0.1ppb Zearalenone Mikotoksin Test Kitleri, Yem Mısır 96 Kuyuları/Kiti için

Yem Mısır 96 Kuyuları için Zearalenone ELISA Test Kiti/Kit Hassasiyet 0.1 ppb

 

1. İlke

Bu test kiti, Zearalenone'un tespiti için rekabetçi enzim immünoanalizine dayanmaktadır.Birleştirme antijeni, mikro kuyucuklu şeritler üzerinde önceden kaplanmıştır.Numunedeki Zearalenone ve mikro kuyucuk şeritleri üzerine önceden kaplanmış kuplaj antijenleri, Zearalenone karşıtı antikorlar için rekabet eder.Enzim konjugatının eklenmesinden sonra, renklendirme için TMB substratı eklenir.Numunenin optik yoğunluk (OD) değeri, numunedeki Zearalenone ile negatif bir korelasyona sahiptir.Bu değer, standart eğri ile karşılaştırılır ve ardından Zearalenone kalıntıları elde edilir.

2. Teknik özellikler

Hassasiyet: 0.1 ppb
İnkübatör sıcaklığı: 25 ℃
İnkübatör süresi: 30dk～15dk

Algılama sınırı:
10ppb besle
Pirinç, Mısır, Fıstık 5ppb

Çapraz reaksiyon oranı:
Zearalenon %100

Geri Dönüşüm Oranı:
Yem, pirinç, Fıstık, mısır 100±30%

3. Bileşenler

 

 

1	Mikro kuyu şeritleri	Her biri 8 çıkarılabilir kuyuya sahip 12 şerit
2	6 × standart solüsyon (her biri 1 mL)	0 ppb	0.1 sayfa/b
		0,3 sayfa/b	0,9 sayfa/b
		2,7 sayfa/b	8.1 sayfa/b
3	enzim eşleniği	7 ml	kırmızı şapka
4	Antikor çalışma çözümü	7 ml	Mavi şapka
5	Yüzey A	7 ml	Beyaz şapka
6	SubstratB	7 ml	siyah kap
7	Çözümü durdur	7 ml	sarı şapka
8	20X konsantre yıkama tamponu	40 ml	Beyaz şapka
9	2X konsantre yeniden çözünen çözelti	50 ml	şeffaf kapak

 

4. Gerekli ancak sağlanmayan malzemeler

1) Ekipman: ELISA Okuyucu (450 nm/630nm), homojenleştirici, çalkalayıcı, santrifüj, denge: 0.01g miktara duyarlı, nitrojen kurutma cihazı, inkübatör, dereceli pipetler, yazıcı
2) Mikropipetler: tek kanallı 20l ~ 200l, 100l ~ 1000l, çok kanallı 30～300 μl
3) Reaktifler: Metanol, n-heksan.

5. Örnek ön işlem

Talimatlar (Ön işlemden önce aşağıdaki noktalara dikkat edilmelidir)
1) Deneyler için sadece tek kullanımlık uçlar kullanılabilir ve farklı reaktifleri absorbe etmek için kullanıldığında uçların değiştirilmesi gerekir;
2) Deneyden önce, deney sonuçlarına müdahale eden kontaminasyonu önlemek için her deney aleti temiz olmalı ve gerekirse yeniden temizlenmelidir.

Numune ön muamelesinden önce çözelti hazırlığı:
Çözüm numarası1: Örnek yeniden çözme
2x konsantre yeniden çözündürme solüsyonu, numunenin yeniden çözündürülmesi için kullanılan 1:1 oranında deiyonize su ile (1 kısım konsantre yeniden çözünen solüsyon + 1 kısım deiyonize su) seyreltilir.
Çözüm numarası2: Örnek özü çözüm
7 kısım Metanol + 3 kısım deiyonize su, kullanıma hazır örnek ekstrakt çözeltisini elde etmek için.

Numune Hazırlama
5.1 Yem numunesinin hazırlanması
1) 1.0±0.05g öğütülmüş besleme numunesini 50ml santrifüj tüpüne alın, 5ml numune özü solüsyonu ekleyin;
2) 3 dakika boyunca tamamen çalkalayın (veya 5 dakikanın üzerinde elle çalkalayın), 4000r/dk üzerinde 20°C'de 10 dakika boyunca santrifüjleyin;
3) 50ul süpernatantı (üst katman) alın, 950ul numuneyi yeniden çözündürerek ekleyin, eşit şekilde sallayın;
4) Test etmek için 50μl alın
Seyreltme faktörü: 100
Not: Numunedeki ilaç kalıntısı konsantrasyonu eğri aralığının dışındaysa, numune test için daha fazla seyreltilebilir (örneğin: 50ul süpernatantı (üst katman) yeni bir santrifüj tüpüne alın, 1450ul deiyonize su ekleyin, seyreltme faktörü 150'dir).

5.2 Mısır, pirinç numunesinin hazırlanması
1) 1.0±0.05g öğütülmüş numuneyi 50ml santrifüj tüpüne alın;5 ml numune özü solüsyonu ekleyin;
2) 3 dakika boyunca tamamen çalkalayın (veya 5 dakikanın üzerinde elle çalkalayın), 4000r/dk üzerinde 20°C'de 10 dakika boyunca santrifüjleyin;
3) 100ul süpernatantı (üst katman) alın, 900ul numuneyi yeniden çözündürerek ekleyin, eşit şekilde sallayın;
4) Test etmek için 50μl alın
Seyreltme faktörü: 50
Not: Numunenin ilaç kalıntısı konsantrasyonu eğri aralığının dışındaysa, numune test için daha fazla seyreltilebilir (örneğin: 50ul süpernatantı (üst katman) yeni bir santrifüj tüpüne alın, 950 deiyonize su ekleyin, seyreltme faktörü 100'dür).

5.3 Yerfıstığı örneğinin hazırlanması
1) 1.0±0.05g öğütülmüş fıstık örneğini 50ml santrifüj tüpüne alın;5ml numune özü solüsyonu ekleyin, ardından 4ml n-heksan ekleyin;
2) 3 dakika boyunca tamamen çalkalayın (veya 5 dakikanın üzerinde elle çalkalayın), 4000r/dk üzerinde 20°C'de 10 dakika boyunca santrifüjleyin;
3) Üst katmandaki berrak sıvıyı atın, 100ul orta katman sıvısını alın, 900ul numuneyi yeniden çözündürerek ekleyin, eşit şekilde sallayın;
4) Test etmek için 50μl alın
Seyreltme faktörü: 50
Not: Numunenin ilaç kalıntısı konsantrasyonu eğri aralığının dışındaysa, numune test için daha fazla seyreltilebilir (örneğin: 50ul orta tabaka sıvıyı yeni bir santrifüj tüpüne alın, 950 deiyonize su ekleyin, seyreltme faktörü 100'dür. ).

 

6. ELISA prosedürleri

6.1 Talimatlar
1. Kullanmadan önce ELISA reaktiflerini oda sıcaklığına (20 - 25 °C) getirin.
2. Kullanımdan hemen sonra ELISA reaktiflerini 2-8 ℃'ye geri koyun
3. Analiz sürecinde ELISA tekrarlanabilirliği, büyük ölçüde yıkama plakasının kıvamına bağlıdır, doğru yıkama plakası işlemi, belirleme noktasıdır ELISA programı
4. Tüm sabit sıcaklıkta inkübasyon sürecinde, ışığa maruz kalmaktan kaçının, mikroplakayı kapak membranı ile kapatın.

6.2 İşletim prosedürleri

1. Kiti en az 30 dakika oda sıcaklığında (20-25°C) tutun, kullanımdan önce her reaktifin iyice çalkalanması gerektiğini unutmayın;
2. İstenen mikro kuyu şeritlerini plaka çerçevesine yerleştirin.Kullanılmayan mikroplakalar tekrar kapatılmalı ve dondurulmamalı, 2-8°C'de saklanmalıdır.
3. Çözelti hazırlama: 40 ml 20x konsantre yıkama tamponu alın ve 1:19 oranında deiyonize suda çözündürün (1 kısım 20x konsantre yıkama tamponu + 19 kısım deiyonize su) veya gerektiği gibi hazırlayın.
4. Numaralandırma: Mikro kuyuları numunelere ve standart solüsyonlara göre numaralandırın;her numune ve standart çözelti iki kopya halinde yapılmalıdır;pozisyonlarını kaydedin.
5. Standart/numune ekleyin: Çift kuyuları ayırmak için 50 µL numune veya standart solüsyon ekleyin, ardından enzim konjugatı, 50 µL/kuyucuk ekleyin;sonra antikor çalışma solüsyonu, 50 uL/kuyu.Plakayı elle sallayarak hafifçe karıştırın, mikroplakayı bir kapak filmi ile kapatın ve karanlıkta 25 °C'de 30 dakika inkübe edin.
6. Mikroplakayı yıkayın: Kapak filmini dikkatlice açın ve sıvıyı mikro kuyuya dökün;250 µL/kuyu yıkama tamponu ekleyin, 4-5 kez her seferinde 15-30 saniye boyunca iyice yıkayın, ardından emici kağıt Pat kuru ile çıkarın.(Kurutulduktan sonra hava kabarcıklarını kullanılmamış bir mızrakla delin)
7. Renk gelişimi: Her kuyuya 50 µL Substrat A solüsyonu ekleyin, ardından 50 μL Solüsyon B. Plakayı elle sallayarak hafifçe karıştırın ve boyama için karanlıkta 25 °C'de 15 dakika inkübe edin.
8. Test: Her kuyucuğa 50 µL Durdurma Solüsyonu ekleyin.Plakayı elinizle sallayarak hafifçe karıştırın.Her kuyunun OD değerini belirlemek için mikroplaka okuyucunun dalga boyunu 450 nm'ye ayarlayın.(5 dakika içerisinde 450/630 nm çift dalga boyunda OD değerlerinin okunması tavsiye edilir).

 

7. Sonuç kararı

Sonuçları yargılamak için iki yöntem vardır;birincisi kaba bir yargı, ikincisi ise niceliksel belirlemedir.Numunenin OD değerinin numunedeki Zearalenone ile negatif bir korelasyona sahip olduğuna dikkat edin.
7.1 Niteliksel belirleme
Konsantrasyon aralığı (ppb), ortalama absorbans değerinin standartlarla karşılaştırılmasıyla elde edilebilir.Örnek Bir'in absorbans değerinin 0.3, Örnek İki'nin 1.0 olduğunu ve standartların: 0ppb 2.243;1.816'nın 0.1 ppb'si;1.415'in 0.3ppb'si;0,74 0.9ppb;0,313'lük 2,7 ppb;8.1ppb 0.155.Daha sonra numunenin konsantrasyonu 2.7ppb ~ 8.1ppb aralığındadır;Örnek İki 0.3ppb ~ 0.9ppb'dir.Numunelerdeki Zearalenone konsantrasyon aralığı, numunenin karşılık gelen seyreltmesi ile çarpılarak elde edilebilir.
7. 2 Kantitatif Analiz
Numunelerin konsantrasyonunu hesaplamak için standart bir eğri yapılmalıdır.Standart eğri yapılmadan önce % absorbans kavramı bilinmelidir.
% absorbans hesabı:

 

Absorbans değerinin yüzdesi =	B	×100%
	B0

B—örnek veya standart çözeltinin ortalama OD değeri
B0—0 ng/mL standart solüsyonun ortalama OD değeri
Sıfır standardı böylece %100'e eşit yapılır ve absorbans değerleri yüzde olarak belirtilir.Standartlar için hesaplanan değerler, Zearalenone konsantrasyonuna [ng/mL] karşı semilogaritmik grafik kağıdındaki bir koordinat sistemine girilir.Her numunenin absorbansına karşılık gelen ng/ml cinsinden Zearalenon konsantrasyonu, kalibrasyon eğrisinden okunabilir.
ELISA'nın sonuç analizi için özel bir yazılım, ikili veya çoklu belirlemeleri kolaylaştıracaktır.İhtiyacınız varsa, lütfen talep etmek için arayın.

8. Önlemler

1. 25 ℃'nin altındaki oda sıcaklığı veya reaktiflerin sıcaklığı ve numunelerin oda sıcaklığına (20-25 ℃) döndürülmemesi, daha düşük bir standart OD değerine yol açacaktır.
2. Mikroplakanın yıkama işlemindeki kuruluğuna, doğrusal olmayan standart eğriler ve istenmeyen tekrarlanabilirlik gibi durumlar eşlik edecektir;Bu yüzden yıkadıktan hemen sonra bir sonraki adıma geçin.
3. Herhangi bir reaktif eklemeden önce eşit şekilde karıştırın.
4. Durdurma solüsyonu 2 M sülfürik asit solüsyonudur, cilt ile temasından kaçının.
5. Son kullanma tarihi geçen kiti kullanmayınız.Kitlerden seyreltilmiş veya katkısız reaktiflerin kullanılması, duyarlılıkta ve OD değerlerinde tespitte değişikliklere yol açacaktır.Kullanılacak farklı lot numaralarına sahip kitlerdeki reaktifleri değiştirmeyin.
6. Depolama: 2-8 ℃'de saklayın, dondurmayın.Yeniden mühürlemek için kullanılmayan mikroplakayı otomatik kapanan bir torbaya koyun.Standart madde ve renksiz renk oluşturucu ışığa duyarlıdır ve bu nedenle doğrudan ışığa maruz bırakılamazlar.
7. Bu solüsyonun dejenerasyonunu gösteren herhangi bir renkle renklendirme solüsyonunu atın.0 standart solüsyonunun (0 ppb) 0,5((A450nm<0.5)) değerinin altındaki saptama değeri(450/630nm) dejenerasyonunu gösterir.
8. Optimum reaksiyon sıcaklığı 25 ℃'dir ve çok yüksek veya çok düşük sıcaklıklar, algılama hassasiyeti ve OD değerlerinde değişikliklere neden olacaktır.

9. Saklama ve son kullanma tarihi

Depolama: 2-8 ℃'de saklayın, dondurmayın.
Son kullanma tarihi: 12 ay;üretim tarihi kutu üzerindedir.
Not: Mikroplakanın Vakum paketinde sızıntı varsa, kullanımı hala geçerlidir, test sonucunu etkilemez, kullanmak için rahat olun.

 

 

 

 

 

 

 

S1: Ne zaman sevk edilecek?
A1: Ödemeyi aldıktan sonra 7 iş günü içinde malları sizin için en kısa sürede göndeririz.(Salgın gibi dış etkenler olması durumunda teslimat gecikebilir)

 

S2: OEM/ODM'yi destekliyor mu?
A2: Desteklenebilir, ancak belirli miktarın özelleştirilmiş ürünler için uygun olan 100.000 parçadan fazla olması gerekir.

 

Q3: Fabrikanız kalite kontrol açısından nasıl gidiyor?
A3: Ulusal olarak ISO9001 ve ISO13485 sertifikasına sahibiz.Üretim sürecimiz, optimum ürün kalitesini sağlamak için standart prosedürlere uygundur.

 

S4: Satış sonrası hizmet nasıl sağlanır?
A4: Profesyonel çevrimiçi teknik satış sonrası hizmet sunuyoruz.Size video, telefon vb. aracılığıyla bire bir rehberlik sağlayabiliriz.

 

S5: Ödeme yöntemi nedir?
A5: T/T ile ödeme alıyoruz.

 

S6: Nasıl gönderilir?
A6: Birçok ortak taşıyıcımızdan fiyat teklifi alarak sizin için en iyi nakliye yöntemini seçin ve ayrıca gereksinimlerinize göre gönderin.