Süt Hassasiyeti için Nitrofuran AMOZ ELISA Gıda Güvenliği Hızlı Test Kiti 0.03ppb 96Wells/Kit

Süt Hassasiyeti için Nitrofuran AMOZ ELISA Gıda Güvenliği Test Kiti 0.03ppb 96Wells/Kit

 

1.Nitrofuran AMOZ ELISA Gıda Güvenliği Test KitiPrensip

 

Bu tespit kiti, numunelerde AMOZ tespiti için rekabetçi bir enzim immünoanalizine dayanmaktadır.Konjuge antijenler, mikro kuyucuklu şeritler üzerinde önceden kaplanmıştır.Örnekteki AMOZ, anti-AMOZ antikoru için mikro kuyucuk şeridi üzerinde önceden kaplanmış konjuge antijen ile rekabet eder.Enzim konjugatı eklendikten sonra boyama için TMB substratı eklenir.Bir numunenin optik yoğunluk (OD) değeri, içindeki AMOZ ile negatif ilişkilidir.Bu değer standart bir eğri ile karşılaştırılır ve ardından AMOZ konsantrasyonu elde edilir.

 

2. Teknik özellikler

 

Hassasiyet: 0.03ppb

Kuluçka Sıcaklığı: 25℃

Kuluçka Süresi: 30dk～15dk

Tespit sınırı Doku, yumurta, bal: 0.1ppb

Çapraz reaksiyon oranı

%100

AHD < %0,1

AOZ < %0,1

SEM < %0,1

Geri Dönüşüm Oranı

Doku 80 ± %25

Bal 75 ± %25

Yumurta 95 ± %25

 

3.Nitrofuran AMOZ ELISA Gıda Güvenliği Test KitiBileşenler

 

1	Mikro kuyu şeritleri	8 çıkarılabilir ile 12 şerit her biri kuyu
2	6 × standart solüsyon (her biri 1 mL)	0ppb	0.03 ppb
		0.09 ppb	0.27ppb
		0,81ppb	2.43 ppb
3	enzim eşleniği	7ml	kırmızı şapka
4	Antikor çalışma çözümü	7ml	Mavi şapka
5	Yüzey A	7ml	Beyaz şapka
6	SubstratB	7ml	siyah kap
7	Çözümü durdur	7ml	sarı şapka
8	20x konsantre yıkama tamponu	40ml	Beyaz şapka
9	2 × konsantre yeniden çözünen çözelti	50ml	şeffaf kapak
10	2-Nitrobenzaldehit (C7H5NO3)	2-Nitrobenzaldehit (C7H5NO3)	2-Nitrobenzaldehit (C7H5NO3)

 

4. Gerekli ancak sağlanmayan malzemeler

 

1) Ekipman: mikroplaka okuyucu, yazıcı, homojenleştirici, nitrojen kurutucu, vorteksleyici, santrifüj, ölçüm tüpü, terazi (karşılıklı 0.01g), inkübatör, su banyosu;

2) Mikropipet: tek kanallı 20-200µL, 100-1000µL, çok kanallı 30-300µl;

3) Reaktifler: NaOH, etil asetat, n-heksan, HCl (yaklaşık %36,5), K2HP04 3H2O.

 

5. Örnek ön işlem

 

öğretmek

Herhangi bir numune ön muamelesinden önce aşağıdaki noktalara değinilmelidir:

1) Deneyde yalnızca tek kullanımlık uçlar kullanılabilir ve farklı reaktifler aspire edilirken uçlar değiştirilmelidir;

2) Deneyden önce, deney sonuçlarına müdahale eden kontaminasyonu önlemek için deney ekipmanı temizlenmeli ve gerekirse yeniden temizlenmelidir.

Numune ön işlemi öncesi çözelti hazırlama:

1) 0.1 M K2HPO4: 11.4 g K2HPO4·3H2O'yu deiyonize suda 500 mL'ye kadar çözün.

2) 1 M HCl: 8.6 mL HCl'yi (yaklaşık %36.5) deiyonize suda 100 mL'ye çözün.

3) 1 M NaOH: 4 g NaOH deiyonize suda 100 mL'ye çözülür.

4) Numunenin yeniden çözülmesi için 2x konsantre yeniden çözünme solüsyonunu 1:1 (1 mL konsantre yeniden çözündürme solüsyonu + 1 mL deiyonize su) deiyonize su ile seyreltin.

 

5.1 Numune hazırlama

a) Doku, yumurta

1) 1± 0.05g homojenize numuneyi tartın, her tüpe 4mL distile su, 0.5mL 1 M HCI ve 100µL 2-Nitrobenzaldehit (C7H5NO3) ekleyin, 2 dakika boyunca uygun şekilde sallayın;

2) Gece boyunca 37°C'de (yaklaşık 16 saat) veya 56°C'de su banyosu (2 saat) ile inkübe edin.

3) Her tüpe 5mL 0.1M K2HP04, 0.4mL 1M NaOH ve 6mL etil asetat ekleyin, 30 saniye çalkalayın.

4) 10 dakika boyunca oda sıcaklığında (20-25 ℃) 4000r/dk'nın üzerinde santrifüjleyin (Emülsifikasyon varsa veya etil asetat tabakası 3 ml için yeterli değilse, numuneyi 80 ℃ su banyosunda 10 dakika inkübe edin ve tekrar tekrar santrifüjleyin; veya hızı artırın ve santrifüj süresini uzatın).

5) 3 mL etil asetat tabakasını yeni bir santrifüj tüpüne aktarın ve nitrojen veya hava ile 50°C'de kuruyana kadar buharlaştırın.

6) Kuru kalıntıları 2mL N-heksan içinde çözün, 1 mL seyreltilmiş yeniden çözme solüsyonunu ekleyin, 30 saniye boyunca uygun şekilde karıştırın, oda sıcaklığında (20-25 ℃) 10 dakika boyunca 4000 r/dk'nın üzerinde santrifüjleyin;Üst katman N-heksan fazını çıkarın (Emülsifikasyon varsa, üst katman N-heksan fazını çıkardıktan sonra numuneyi 70 ℃ su banyosunda 10-20 dakika inkübe edin, tekrar tekrar santrifüjleyin).

7) Analiz için alttan 50 µL alın.

Numunenin seyreltme katı: 2

b) Bal

1) 2± 0.05 g homojenize numuneyi (bal) tartın, her bir tüpe 4mL distile su, 0.5mL 1 M HCI ve 100 µL 2-Nitrobenzaldehit (C7H5NO3) ekleyin, 2 dakika boyunca uygun şekilde sallayın;

2) Gece boyunca 37°C'de (yaklaşık 16 saat) veya 56°C'de su banyosu (2 saat) ile inkübe edin.

3) Her tüpe 5mL 0.1M K2HP04, 0.4mL 1M NaOH ve 6mL etil asetat ekleyin, 30 saniye çalkalayın.

4) 10 dakika boyunca oda sıcaklığında (20-25 ℃) 4000r/dk'nın üzerinde santrifüjleyin (Emülsifikasyon varsa veya etil asetat tabakası 3 ml için yeterli değilse, numuneyi 80 ℃ su banyosunda 10 dakika inkübe edin ve tekrar tekrar santrifüjleyin; veya hızı artırın ve santrifüj süresini uzatın).

5) 3 mL etil asetat tabakasını yeni bir santrifüj tüpüne aktarın ve nitrojen veya hava ile 50°C'de kuruyana kadar buharlaştırın.

6) Kuru kalıntıları 2 mL N-heksan içinde çözün, 1 mL seyreltilmiş yeniden çözme solüsyonunu ekleyin, 30 saniye boyunca uygun şekilde karıştırın, oda sıcaklığında (20-25 ℃) 10 dakika boyunca 4000r/dk'nın üzerinde santrifüjleyin;Üst katman N-heksan fazını çıkarın (Emülsifikasyon varsa, üst katman N-heksan fazını çıkardıktan sonra numuneyi 70 ℃ su banyosunda 10-20 dakika inkübe edin, tekrar tekrar santrifüjleyin).

7) Analiz için alttan 50 µL alın.

Numunenin seyreltme katı:1

 

6. ELISA prosedürleri

 

6.1 Talimatlar

1) Kullanmadan önce tüm reaktifleri ve mikro kuyucuklu stripleri oda sıcaklığına (20-25 ℃) getirin;

2) Kullanımdan hemen sonra tüm reaktifleri 2-8 ℃'ye döndürün;

3) ELISA analizinin tekrarlanabilirliği, büyük ölçüde, plaka yıkamanın kıvamına bağlıdır.Plaka yıkamanın doğru çalışması ELISA prosedürlerinde kilit noktadır;

4) Sabit sıcaklıklarda inkübasyon için, tüm numuneler ve reaktifler ışığa maruz kalmamalı ve her mikroplaka kapak membranı ile kapatılmalıdır.

6.2 İşletim prosedürleri

1) Test kitini en az 30 dakika oda sıcaklığına (20-25 ℃) getirin, kullanımdan önce her reaktifin eşit şekilde karışması için çalkalanması gerektiğini unutmayın, gerekli mikro kuyulu stripleri plaka çerçevelerine koyun.Kullanılmayan mikroplakayı tekrar kapatın, 2-8 ℃'de saklayın, dondurmayın.

2) Çözelti hazırlama: 40 mL 20 x konsantre yıkama tamponunu 1:19 oranında deiyonize su ile seyreltin (1 kısım 20 x konsantre yıkama tamponu + 19 kısım deiyonize su).Veya gerektiği gibi hazırlayın.

3) Numaralandırma: mikro kuyuları numunelere ve standart çözeltiye göre numaralandırın;her numune ve standart çözelti iki kopya halinde yapılmalı, konumlarını kaydetmelidir.

4) Ayrı çift kuyucuklara 50µL numune veya standart solüsyon ekleyin;50ul enzim konjugatını ve ardından 50uL antikor çalışma solüsyonunu her kuyucuğa ekleyin, plakayı elle sallayarak hafifçe karıştırın.Mikroplakayı kapak membranı ile kapatın ve 25 ℃'de 30 dakika inkübe edin.

5) Sıvıyı mikro kuyudan boşaltın, emici kağıt üzerinde kuruması için kapağı kapatın, mikroplakayı 15-30 saniye yıkamak için 250 µL/kuyu yıkama tamponu ekleyin, ardından çıkarın ve emici kağıt ile kurulayın, 4-5 kez tekrarlayın.(Çırptıktan sonra kabarcıklar varsa temiz uçlarla kesin).

6) Renklendirme: Her kuyuya 50 µL substrat A ve ardından 50 μL substrat B ekleyin.Plakayı elle sallayarak hafifçe karıştırın, ardından renklenmesi için karanlıkta 25 ℃'de 15 dakika inkübe edin.

7) Belirleme: Her kuyucuğa 50µL stop solüsyonu ekleyin.Plakayı elle sallayarak hafifçe karıştırın.Her kuyunun OD değerini belirlemek için mikroplaka okuyucunun dalga boyunu 450nm'ye ayarlayın.(Çift dalga boyunda 450/630nm'de OD değerini 5 dakika içinde okumanızı tavsiye ederiz).

 

7. Sonuç kararı

 

Sonuçları yargılamak için iki yöntem vardır: birincisi kabaca değerlendirme, ikincisi ise nicel belirlemedir.Numunenin OD değerinin AMOZ konsantrasyonu ile negatif bir korelasyona sahip olduğuna dikkat edin.

7.1 Niteliksel belirleme

AMOZ'un konsantrasyon aralığı (ng/mL), örneğin ortalama OD değerinin standart çözeltininkiyle karşılaştırılmasıyla elde edilebilir.Numunenin OD değerinin 0,3 ve numuneninⅡ değerinin 1,0 olduğunu varsayarsak, standart çözeltilerin OD değeri: 0ppb için 2.243, 0.03ppb için 1.816, 0.09ppb için 1.415, 0.27ppb için 0.74, 0.81ppb için 0.313'tür. , 0.155 2.43ppb için, buna göre numunenin konsantrasyon aralığıⅠ 0.81 ila 2.43ppb'dir ve numuneninkiⅡ 0.09 ila 0.27ppb'dir.

7.2 Nicel belirleme

Absorbans değerlerinin ortalama değerleri, numunenin ve standart solüsyonun ortalama OD değeri (B) için elde edilir ve birinci standart solüsyonun (0 standart) OD değerine (B0) bölünür ve ardından %100 ile çarpılır, yani ,

Absorbans değerinin yüzdesi =	B	×100%
	B0

B—örnek veya standart çözeltinin ortalama OD değeri

B0—0 ng/mL standart solüsyonun ortalama OD değeri

Standart çözeltinin absorpsiyon yüzdeleri ve AMOZ standart çözümünün (ng/mL) semilogaritma değerleri ile standart eğriyi sırasıyla Y ve X ekseni olarak çizin.Absorpsiyon yüzdesini standart eğriye dahil ederek standart eğriden numunenin karşılık gelen konsantrasyonunu okuyun.Elde edilen değer daha sonra karşılık gelen seyreltme katıyla çarpılır ve son olarak numunedeki AMOZ konsantrasyonu elde edilir.

 

8. Önlemler

 

1) Oda sıcaklığı 25°C'den düşükse veya reaktif sıcaklığı ve numune oda sıcaklığına (20-25°C) dönmezse, standart OD değeri düşer.

2) Yıkama işlemi sırasında, mikro plakanın kurumasına standart eğrinin doğrusal olmaması eşlik edecek ve tekrarlanabilirlik ideal değil;bu nedenle yıkamadan hemen sonra bir sonraki adıma geçin.

3) İyice karıştırın, aksi takdirde tekrarlanabilirlik zayıf olacaktır.

4) Durdurma solüsyonu 2 M sülfürik asit solüsyonudur, cilt temasından kaçının.

5) Kiti raf ömründen sonra kullanmayınız.Kitten seyreltilmiş veya katkısız reaktiflerin kullanılması, duyarlılıkta ve saptama OD değerlerinde değişikliklere neden olabilir.Farklı kit gruplarındaki reaktifleri değiştirmeyin.

6) Kullanılmayan mikroplakaları kilitli torbalarda tekrar kapatın.Standart çözümler ve renksiz kuplörler ışığa duyarlıdır ve doğrudan ışığa maruz bırakılamaz.

7) Rengi, çözeltinin bozulduğunu gösteren herhangi bir renklendirme çözeltisini atın.Standart Çözüm 1 (0 ppb) için 0,5'ten küçük bir saptama değeri, bozulmayı gösterir.

8) Optimum reaksiyon sıcaklığı 25℃'dir ve sıcaklık çok yüksek veya çok düşükse algılama hassasiyeti ve OD değeri değişecektir.

 

9. Saklama ve son kullanma tarihi

 

Depolama: 2-8 ℃'de saklayın, dondurmayın.

Son kullanma tarihi: 12 ay;üretim tarihi kutu üzerindedir.

Not: Mikroplakanın Vakum paketinde sızıntı varsa, kullanımı hala geçerlidir, test sonucunu etkilemez, kullanmak için rahat olun.

 

 

S1: Ne zaman sevk edilecek?
A1: Ödemeyi aldıktan sonra 7 iş günü içinde malları sizin için en kısa sürede göndeririz.(Salgın gibi dış etkenler olması durumunda teslimat gecikebilir)

 

S2: OEM/ODM'yi destekliyor mu?
A2: Desteklenebilir, ancak belirli miktarın özelleştirilmiş ürünler için uygun olan 100.000 parçadan fazla olması gerekir.

 

Q3: Fabrikanız kalite kontrol açısından nasıl gidiyor?
A3: Ulusal olarak ISO9001 ve ISO13485 sertifikasına sahibiz.Üretim sürecimiz, optimum ürün kalitesini sağlamak için standart prosedürlere uygundur.

 

S4: Satış sonrası hizmet nasıl sağlanır?
A4: Profesyonel çevrimiçi teknik satış sonrası hizmet sunuyoruz.Size video, telefon vb. aracılığıyla bire bir rehberlik sağlayabiliriz.

 

S5: Ödeme yöntemi nedir?
A5: T/T ile ödeme alıyoruz.

 

S6: Nasıl gönderilir?
A6: Birçok ortak taşıyıcımızdan fiyat teklifi alarak sizin için en iyi nakliye yöntemini seçin ve ayrıca gereksinimlerinize göre gönderin.