Yem Pirinç 3ppb için Trichothecenes T-2 Fıstık Test Kiti ELISA Aflatoksin Test Cihazları

Yem Fıstık Pirinç 96 Kuyu/Kit için Trichothecenes (T-2) ELISA test kiti

 

1. İlke

Bu test kiti, Trichothecenes'in (T-2) tespiti için rekabetçi enzim immünoanalizine dayanmaktadır.Birleştirme antijeni, mikro kuyucuklu şeritler üzerinde önceden kaplanmıştır.Numunedeki Trichothecenes (T-2) ve mikro kuyucuk şeritleri üzerine önceden kaplanmış kuplaj antijenleri, anti-Trichotecenes (T-2) antikorları için rekabet eder.Enzim konjugatının eklenmesinden sonra, renklendirme için TMB substratı eklenir.Numunenin optik yoğunluk (OD) değeri, numunedeki Trichothecenes (T-2) ile negatif bir korelasyona sahiptir.Bu değer, standart eğri ile karşılaştırılır ve ardından Trichothecenes (T-2) kalıntıları elde edilir.

 

2. Teknik özellikler

Hassasiyet: 0,05 ppb
İnkübatör sıcaklığı: 25 ℃
İnkübatör süresi: 30dk～15dk
Algılama sınırı:
Yem, fıstık, pirinç 3ppb
Çapraz reaksiyon oranı:
Trikotesenler (T-2) %100
Geri Dönüşüm Oranı:
Yem, pirinç %90±25
Fıstık 85±25%

 

3. Bileşenler

 

1	Mikro kuyu şeritleri	Her biri 8 çıkarılabilir kuyuya sahip 12 şerit
2	6 × standart solüsyon (her biri 1 mL)	0ppb	0.05ppb
		0.15 ppb	0.45ppb
		1.35ppb	4.05 ppb
3	enzim eşleniği	7ml	kırmızı şapka
4	Antikor çalışma çözümü	7ml	Mavi şapka
5	Yüzey A	7ml	Beyaz şapka
6	SubstratB	7ml	siyah kap
7	Çözümü durdur	7ml	sarı şapka
8	20x konsantre yıkama tamponu	15ml	Beyaz şapka
9	5 × konsantre yeniden çözünen çözelti	50ml*2	şeffaf kapak

 

4. Gerekli ancak sağlanmayan malzemeler

1) Ekipman: ELISA Okuyucu (450 nm/630nm), homojenleştirici, çalkalayıcı, santrifüj, denge: 0.01g miktara duyarlı, nitrojen kurutma cihazı, inkübatör, dereceli pipetler, yazıcı
2) Mikropipetler:tek kanallı 20ml ~ 200ml, 100ml ~ 1000ml, çok kanallı 30～300 μl
3) Reaktifler: Metanol.

5. Örnek ön işlem

Talimatlar (Ön işlemden önce aşağıdaki noktalar ele alınmalıdır)
1) Deneyler için sadece tek kullanımlık uçlar kullanılabilir ve farklı reaktifleri absorbe etmek için kullanıldığında uçların değiştirilmesi gerekir;
2) Deneyden önce, deney sonuçlarına müdahale eden kontaminasyonu önlemek için her deney aleti temiz olmalı ve gerekirse yeniden temizlenmelidir.

Numune ön muamelesinden önce çözelti hazırlığı:
1) Numune yeniden çözünen çözelti
1 kısım (5X) konsantre yeniden çözündürme solüsyonu kullanın ve kullanıma hazır numune yeniden çözündürme solüsyonunu elde etmek için 4 kısım deiyonize su ile çözün.
2) Örnek özüt çözeltisi
1 kısım Metanol kullanın ve kullanıma hazır numune ekstraktı solüsyonunu elde etmek için 1 kısım numune yeniden çözme solüsyonu ile çözün.
Yem, fıstık, pirinç numunesinin hazırlanması

1) 1.0±0.05g öğütülmüş numuneyi 50ml santrifüj tüpüne alın, 5ml numune ekstrakt solüsyonu ekleyin, 3 dk çalkalayın, 4000r/dk üzerinde 20°C'de 10 dk santrifüjleyin;
2) 100ul süpernatant (üst katman) alın, 400ul numune yeniden çözme solüsyonu ekleyin, eşit şekilde sallayın;
3) Test etmek için 50μl alın
Seyreltme faktörü:25

 

6. ELISA prosedürleri

6.1 Talimatlar

1)Kullanmadan önce ELISA reaktiflerini oda sıcaklığına (20 - 25 °C) getirin.
2)Kullanımdan hemen sonra ELISA reaktiflerini 2-8 ℃'ye geri koyun
3)Analiz sürecinde ELISA tekrarlanabilirliği, büyük ölçüde yıkama plakasının kıvamına bağlıdır, doğru yıkama plakası işlemi, belirleme noktasıdır ELISA programı
4)Tüm sabit sıcaklıkta inkübasyon sürecinde, ışığa maruz kalmaktan kaçının, mikroplakayı kapak membranı ile kapatın.

6. 2 Çalıştırma prosedürleri

1)Test kitini en az 30 dakika oda sıcaklığına (20-25 ℃) getirin, kullanımdan önce her reaktifin eşit şekilde çalkalanması gerektiğini unutmayın;
2)Gerekli mikro kuyulu şeritleri plaka çerçevelerine koyun.2-8 ℃'de saklanan kullanılmayan mikroplaka yeniden mühürlendi, dondurulmadı.
3)Çözelti hazırlama: 15ml 20x konsantre yıkama tamponunu alın, 1:19'da deiyonize su ile çözün (1 kısım 20x konsantre yıkama tamponu + 19 kısım deiyonize su) veya gereken miktarda hazırlayın.
4)Numaralandırma: mikro kuyuları numunelere ve standart çözeltiye göre numaralandırın;her numune ve standart çözelti iki kopya halinde yapılmalıdır;pozisyonlarını kaydedin.
5)Standart/numune ekleyin: 50 µL numune veya standart solüsyonu ayrı çift kuyucuklara ekleyin, ardından enzim konjugatı, 50 µL/kuyucuk ekleyin;sonra antikor çalışma solüsyonu, 50 uL/kuyu.Plakayı elle sallayarak hafifçe karıştırın, mikroplakayı kapak membranı ile kapatın, karanlıkta 25 °C'de 30 dakika inkübe edin.
6)Mikroplakayı yıkayın: Kapak zarını dikkatlice açın, sıvıyı mikro kuyudan boşaltın;250 µL/kuyu yıkama tamponu ekleyin, 4-5 kez, her seferinde 15-30 s tamamen yıkayın, sonra çıkarın ve emici kağıt ile kurulayın. (Kuruduktan sonra kabarcığı delmek için kullanılmamış mızrak kullanın)
7)Renklendirme: her bir kuyucuğa 50 µL substrat A solüsyonu ve ardından 50 μL B solüsyonu ekleyin.Plakayı elle sallayarak hafifçe karıştırın ve renklendirme için karanlıkta 15 dakika için 25 °C'de inkübe edin.
8)Belirleme: Her kuyucuğa 50 µL durdurma solüsyonu ekleyin.Plakayı elle sallayarak hafifçe karıştırın.Her kuyunun OD değerini belirlemek için mikroplaka okuyucunun dalga boyunu 450 nm'ye ayarlayın.(5 dakika içinde çift dalga boyunda 450/630 nm'de OD değerini okumanızı tavsiye ederiz).

 

7. Sonuç kararı

Sonuçları yargılamak için iki yöntem vardır;birincisi kaba bir yargı, ikincisi ise niceliksel belirlemedir.Numunenin OD değerinin numunedeki Trichothecenes (T-2) ile negatif bir korelasyona sahip olduğuna dikkat edin.
7.1 Niteliksel belirleme
Konsantrasyon aralığı (ppb), ortalama absorbans değerinin standartlarla karşılaştırılmasıyla elde edilebilir.Örnek Bir'in absorbans değerinin 0.3, Örnek İki'nin 1.0 olduğunu ve standartların: 0ppb 2.243;1.816'nın 0.05ppb'si;1.415'in 0.15 ppb'si;0.74'ün 0.45 ppb'si;0,313'lük 1,35 ppb;4.05ppb 0.155.Daha sonra numunenin konsantrasyonu 1.35ppb ~ 4.05ppb aralığındadır;Örnek İki, 0.15ppb ~ 0.45ppb'dir.Numunelerdeki Trichothecenes (T-2) konsantrasyon aralığı, numunenin karşılık gelen seyreltmesi ile çarpılarak elde edilebilir.
7. 2 Kantitatif Analiz
Numunelerin konsantrasyonunu hesaplamak için standart bir eğri yapılmalıdır.Standart eğri yapılmadan önce % absorbans kavramı bilinmelidir.
% absorbans hesabı:

 

Absorbans değerinin yüzdesi =	B	×100%
	B0

 

B—örnek veya standart çözeltinin ortalama OD değeri
B0—0 ng/mL standart solüsyonun ortalama OD değeri
Sıfır standardı böylece %100'e eşit yapılır ve absorbans değerleri yüzde olarak belirtilir.Standartlar için hesaplanan değerler, Trichothecenes (T-2) konsantrasyonuna [ng/mL] karşı semilogaritmik grafik kağıdındaki bir koordinat sistemine girilir.Her numunenin absorbansına karşılık gelen ng/mL cinsinden Trichothecenes (T-2) konsantrasyonu kalibrasyon eğrisinden okunabilir.
ELISA'nın sonuç analizi için özel bir yazılım, ikili veya çoklu belirlemeleri kolaylaştıracaktır.İhtiyacınız varsa, lütfen talep etmek için arayın.

 

8. Önlemler
1)25 ℃'nin altındaki oda sıcaklığı veya reaktiflerin sıcaklığı ve numunelerin oda sıcaklığına (20-25 ℃) döndürülmemesi, daha düşük bir standart OD değerine yol açacaktır.
2)Mikroplakanın yıkama işleminde kuruluğuna lineer olmayan standart eğriler ve istenmeyen tekrarlanabilirlik gibi durumlar eşlik edecektir;Bu yüzden yıkadıktan hemen sonra bir sonraki adıma geçin.
3)Herhangi bir reaktif eklemeden önce eşit şekilde karıştırın.
4)Durdurma solüsyonu 2 M sülfürik asit solüsyonudur, cilt ile temasından kaçınınız.
5)Son kullanma tarihi geçen kiti kullanmayınız.Kitlerden seyreltilmiş veya katkısız reaktiflerin kullanılması, duyarlılıkta ve OD değerlerinde tespitte değişikliklere yol açacaktır.Kullanılacak farklı lot numaralarına sahip kitlerdeki reaktifleri değiştirmeyin.
6)Depolama: 2-8 ℃'de saklayın, dondurmayın.Yeniden mühürlemek için kullanılmayan mikroplakayı otomatik kapanan bir torbaya koyun.Standart madde ve renksiz renk oluşturucu ışığa duyarlıdır ve bu nedenle doğrudan ışığa maruz bırakılamazlar.
7)Bu çözeltinin dejenerasyonunu gösteren herhangi bir renkle renklendirme çözeltisini atın.0 standart solüsyonunun (0 ppb) 0,5((A450nm<0.5)) değerinin altındaki saptama değeri(450/630nm) dejenerasyonunu gösterir.
8) Optimum reaksiyon sıcaklığı 25℃'dir ve çok yüksek veya çok düşük sıcaklıklar, algılama hassasiyeti ve OD değerlerinde değişikliklere neden olacaktır.

 

9. Saklama ve son kullanma tarihi
Depolama: 2-8 ℃'de saklayın, dondurmayın.
Son kullanma tarihi: 12 ay;üretim tarihi kutu üzerindedir.
Not: Mikroplakanın Vakum paketinde sızıntı varsa, kullanımı hala geçerlidir, test sonucunu etkilemez, kullanmak için rahat olun.

 

 

 

 

 

 

 

 

S1: Göndermeniz ne kadar sürer?
A1: Genellikle 7 iş günü içinde kargoya verilir.

 

Q2: OEM/ODM'yi destekliyor musunuz?
A2: desteklenebilir.Özel ihtiyaçlarınıza ve belirli miktarlara göre özelleştirebiliriz.

 

Q3: Fabrikanız kalite kontrol açısından nasıl gidiyor?
A3: ISO9001 sertifikasına ve ISO13485 sertifikasına sahibiz, şimdiye kadar tüm üretim süreci, standart kurallarımız var, hükümetin ilgili davranış ve yasalarına uyuyoruz.

 

S4: Satış sonrası servis garantili mi?
A4: Profesyonel çevrimiçi teknik satış sonrası hizmet sunuyoruz.Ürün deney sırasında başarısız olursa, sağlayabiliriz
telefon, video ve diğer formlar aracılığıyla bire bir rehberlik.

 

S5: Minimum sipariş miktarınız nedir?
A5: 1Kit.

 

S6: Nakliye yöntemi nedir?
A6: Ekspres (FEDEX, UPS, DHL, EMS, vb.) veya hava ve kara yoluyla gönderilebilir. Lütfen sipariş vermeden önce bizimle onaylayın.