Mısır Dokusu için 30dk Aflatoksinler Fıstık Elisa Mikotoksin Test Kitleri 96 Kuyu / Kit

Yem Mısır Fıstık Dokusu için Toplam Aflatoksinler ELISA Test Kiti 96 Kuyu/Kit

 

1.Mikotoksin Test KitleriPrensip

Bu kit, toplam aflatoksinlerin tespiti için dolaylı rekabetçi enzim immünolojik testine dayanmaktadır.Konjuge antijenler, mikro kuyucuklu şeritler üzerinde önceden kaplanmıştır.Numunedeki aflatoksin, anti-aflatoksin antikorları için mikro kuyucuklu şerit üzerinde önceden kaplanmış konjuge antijen ile rekabet eder.Enzim konjugatı eklendikten sonra boyama için TMB substratı eklenir.Bir numunenin optik yoğunluk (OD) değeri, numunedeki aflatoksin ile negatif olarak ilişkilidir.Bu değer standart bir eğri ile karşılaştırılır ve daha sonra kalıntı aflatoksin seviyesi elde edilir.

 

2. Teknik Özellikler

Hassasiyet: 0.02 ppb
İnkübatör sıcaklığı: 25 ℃
Kültür süresi: 30dk～15dk
Algılama sınırı:
Yem, pirinç, mısır, yer fıstığı, kağıt mendil, yemeklik yağ 2ppb
Çapraz Reaksiyon Oranı:
Aflatoksin B1 %100
Aflatoksin M1 %91,2
Aflatoksin B2 %68,4
Aflatoksin G1 %4.7
Aflatoksin G2 %2.7
Geri Dönüşüm Oranı:
Yem, pirinç, mısır, yer fıstığı, kağıt mendil, yemeklik yağ %95±35

 

3. Mikotoksin Test Kitleri Bileşenleri

 

1	Mikro kuyu şeritleri	Her biri 8 çıkarılabilir kuyuya sahip 12 şerit
2	6 × standart solüsyon (her biri 1 mL)	0ppb	0.02ppb
		0.06 ppb	0.18 ppb
		0,54 ppb	1.62ppb
3	enzim eşleniği	7ml	kırmızı şapka
4	Antikor çalışma çözümü	7ml	Mavi şapka
5	Yüzey A	7ml	Beyaz şapka
6	Substrat B	7ml	siyah kap
7	Çözümü durdur	7ml	sarı şapka
8	20x konsantre yıkama tamponu	40ml	Beyaz şapka
9	20x konsantre yeniden çözünen çözelti	50ml	şeffaf kapak

 

4. Numune Hazırlama

Kullanım talimatları (ön işlemeden önce aşağıdaki noktalara dikkat edilmelidir)
1) Deneyde yalnızca tek kullanımlık uçlar kullanılabilir ve farklı reaktifler aspire edilirken uçlar değiştirilmelidir;
2) Deneyden önce, deney sonuçlarına müdahale eden kontaminasyonu önlemek için her deney aleti temizlenmeli ve gerekirse yeniden temizlenmelidir.

Numune ön işlemi öncesi çözelti hazırlama:
1) Örnek çözünme çözeltisi
1 kısım 20X konsantre yeniden çözündürme solüsyonu kullanın ve kullanıma hazır bir numune yeniden çözündürme solüsyonu elde etmek için 19 kısım deiyonize su ile çözün.
2) Örnek özü
7 kısım metanol kullanın ve kullanıma hazır bir numune özütü için 3 kısım deiyonize suda çözün.

Örnek hazırlama
4.1 Doku, yem, pirinç ve mısır numunelerinin hazırlanması
1) 1.0±0.05 g öğütülmüş numuneyi 50 ml'lik bir santrifüj tüpüne koyun, 5 ml numune özü ekleyin, 3 dakika çalkalayın, 4000r/dk'nın üzerinde 20°C'de 10 dakika santrifüjleyin;
2) 100ul süpernatant alın, 700ul numune yeniden çözme solüsyonu ekleyin, iyice çalkalayın;
3) Test için 50μl alın
Seyreltme faktörü: 40

4.2 Yemeklik yağ numunelerinin hazırlanması
1) 1.0±0.05g yemeklik yağ numunesini 50ml'lik bir santrifüj tüpüne alın;5 ml numune özü ekleyin, ardından 4 ml n-heksan ekleyin, 3 dakika çalkalayın, 4000r/dk'da 20°C'de 10 dakika santrifüjleyin;
2) Süpernatantı atın, orta tabaka çözeltisinden 100 ul alın, 700 ul numune yeniden çözme çözeltisi ekleyin ve iyice çalkalayın;
3) Test için 50μl alın
Seyreltme faktörü: 40

4.3 Fıstık numunelerinin hazırlanması
1) 1.0±0.05g fıstık ezilmiş numuneyi 50ml'lik bir santrifüj tüpüne koyun;5 ml numune özü ekleyin, ardından 4 ml n-heksan ekleyin, 3 dakika çalkalayın, 4000r/dk'da 20°C'nin üzerinde 10 dakika santrifüjleyin;
2) Süpernatantı atın, orta tabaka çözeltisinden 100 ul alın, 400 ul numune yeniden çözme çözeltisi ekleyin ve iyice çalkalayın;
3) Test için 50μl alın
Seyreltme faktörü: 25

 

5. ELISA prosedürleri

5.1 Kullanım talimatları
1) Kullanmadan önce ELISA reaktiflerini oda sıcaklığına (20 - 25 °C) getirin.
2) Kullanımdan hemen sonra ELISA reaktifini 2-8°C'ye geri koyun.
3) ELISA analiz sürecinin tekrarlanabilirliği, büyük ölçüde plaka yıkamanın kıvamına bağlıdır ve doğru plaka yıkama işlemi, ELISA prosedürünü belirlemenin odak noktasıdır.
4) Tüm sabit sıcaklıkta inkübasyon işlemleri sırasında ışıktan kaçının ve mikroplakayı bir kapak filmi ile kapatın.

5.2 Çalıştırma prosedürleri
1)Test kitini en az 30 dakika oda sıcaklığına (20-25 ℃) getirin, kullanımdan önce her reaktifin eşit şekilde çalkalanması gerektiğini unutmayın;
2)Gerekli mikro kuyulu şeritleri plaka çerçevelerine koyun.2-8 ℃'de saklanan kullanılmayan mikroplaka yeniden mühürlendi, dondurulmadı.
3)Çözelti hazırlama: 40ml 20x konsantre yıkama tamponunu alın, 1:19'da deiyonize su ile çözün (1 kısım 20x konsantre yıkama tamponu + 19 kısım deiyonize su) veya gereken miktarda hazırlayın.
4)Numaralandırma: mikro kuyuları numunelere ve standart çözeltiye göre numaralandırın;her numune ve standart çözelti iki kopya halinde yapılmalıdır;pozisyonlarını kaydedin.
5)Standart/numune ekleyin: 50 µL numune veya standart solüsyonu ayrı çift kuyucuklara ekleyin, ardından enzim konjugatı, 50 µL/kuyucuk ekleyin;sonra antikor çalışma solüsyonu, 50 uL/kuyu.Plakayı elle sallayarak hafifçe karıştırın, mikroplakayı membranla kapatın, 25°C'de karanlıkta 30 dakika inkübe edin.
6)Mikroplakayı yıkayın: Kapak zarını dikkatlice açın, sıvıyı mikro kuyudan boşaltın;250 µL/kuyu yıkama tamponu ekleyin, 4-5 kez, her seferinde 15-30 s tamamen yıkayın, sonra çıkarın ve emici kağıt ile kurulayın. (Kuruduktan sonra kabarcığı delmek için kullanılmamış mızrak kullanın)
7)Renklendirme: her bir kuyucuğa 50 µL substrat A solüsyonu ve ardından 50 μL B solüsyonu ekleyin.Plakayı elle sallayarak hafifçe karıştırın ve renklendirme için karanlıkta 25°C'de 15 dakika inkübe edin.
8)Belirleme: Her kuyucuğa 50 µL durdurma solüsyonu ekleyin.Plakayı elle sallayarak hafifçe karıştırın.Her kuyunun OD değerini belirlemek için mikroplaka okuyucunun dalga boyunu 450 nm'ye ayarlayın.(5 dakika içinde çift dalga boyunda 450/630 nm'de OD değerini okumanızı tavsiye ederiz).

 

6. Sonuç kararı

Sonuçları yargılamak için iki yöntem vardır;birincisi kaba bir yargı, ikincisi ise niceliksel belirlemedir.Numunenin OD değerinin numunedeki Toplam Aflatoksin ile negatif bir korelasyona sahip olduğuna dikkat edin.

6.1 Niteliksel belirleme
Konsantrasyon aralığı (ppb), ortalama absorbans değerinin standartlarla karşılaştırılmasıyla elde edilebilir.Örnek Bir'in absorbans değerinin 0.3, Örnek İki'nin 1.0 olduğunu ve standartların: 0ppb 2.243;1.816'nın 0.02ppb'si;1.415'in 0.06 ppb'si;0.74'ün 0.18 ppb'si;0,313'lük 0,54 ppb;1.62ppb 0.155.Daha sonra numunenin konsantrasyonu 0,54ppb ~ 1,62ppb aralığındadır;Örnek İki, 0.06ppb ~ 0.18ppb'dir.Numunelerdeki toplam aflatoksin konsantrasyon aralığı, numunenin karşılık gelen seyreltmesi ile çarpılarak elde edilebilir.

6. 2 Kantitatif Analiz
Numunelerin konsantrasyonunu hesaplamak için standart bir eğri yapılmalıdır.Standart eğri yapılmadan önce % absorbans kavramı bilinmelidir.
% absorbans hesabı:

 

Absorbans değerinin yüzdesi =	B	×100%
	B0

 

B—örnek veya standart çözeltinin ortalama OD değeri.
B0—0 ng/mL standart solüsyonun ortalama OD değeri.
Sıfır standardı böylece %100'e eşit yapılır ve absorbans değerleri yüzde olarak belirtilir.Standartlar için hesaplanan değerler, toplam aflatoksin konsantrasyonuna [ng/L] karşı semilogaritmik grafik kağıdına bir koordinat sistemine girilir.Her numunenin absorbansına karşılık gelen ng/L (ppb) cinsinden toplam aflatoksin konsantrasyonu kalibrasyon eğrisinden okunabilir.
ELISA'nın sonuç analizi için özel bir yazılım, ikili veya çoklu belirlemeleri kolaylaştıracaktır.İhtiyacınız varsa, lütfen talep etmek için arayın.

7. Önlemler

1)25 ℃'nin altındaki oda sıcaklığı veya reaktiflerin sıcaklığı ve numunelerin oda sıcaklığına (20-25 ℃) döndürülmemesi, daha düşük bir standart OD değerine yol açacaktır.
2)Mikroplakanın yıkama işleminde kuruluğuna lineer olmayan standart eğriler ve istenmeyen tekrarlanabilirlik gibi durumlar eşlik edecektir;Bu yüzden yıkadıktan hemen sonra bir sonraki adıma geçin.
3)Herhangi bir reaktif eklemeden önce eşit şekilde karıştırın.
4)Durdurma solüsyonu 2 M sülfürik asit solüsyonudur, cilt ile temasından kaçınınız.
5)Son kullanma tarihi geçen kiti kullanmayınız.Kitlerden seyreltilmiş veya katkısız reaktiflerin kullanılması, duyarlılıkta ve OD değerlerinde tespitte değişikliklere yol açacaktır.Kullanılacak farklı lot numaralarına sahip kitlerdeki reaktifleri değiştirmeyin.
6)Depolama: 2-8 ℃'de saklayın, dondurmayın.Yeniden mühürlemek için kullanılmayan mikroplakayı otomatik kapanan bir torbaya koyun.Standart madde ve renksiz renk oluşturucu ışığa duyarlıdır ve bu nedenle doğrudan ışığa maruz bırakılamazlar.
7)Bu çözeltinin dejenerasyonunu gösteren herhangi bir renkle renklendirme çözeltisini atın.0 standart solüsyonunun (0 ppb) 0,5((A450nm<0.5)) değerinin altındaki saptama değeri(450/630nm) dejenerasyonunu gösterir.
8)Optimum reaksiyon sıcaklığı 25 ℃'dir ve çok yüksek veya çok düşük sıcaklıklar, algılama hassasiyeti ve OD değerlerinde değişikliklere neden olacaktır.

8. Saklama ve son kullanma tarihi

Depolama: 2-8 ℃'de saklayın, dondurmayın.
Son kullanma tarihi: 12 ay;üretim tarihi kutu üzerindedir.
Not: Mikroplakanın Vakum paketinde sızıntı varsa, kullanımı hala geçerlidir, test sonucunu etkilemez, kullanmak için rahat olun.

 

 

 

 

 

 

S1: Ne zaman sevk edilecek?
A1: Ödemeyi aldıktan sonra 7 iş günü içinde malları sizin için en kısa sürede göndeririz.(Salgın gibi dış etkenler olması durumunda teslimat gecikebilir)

 

S2: OEM/ODM'yi destekliyor mu?
A2: Desteklenebilir, ancak belirli miktarın özelleştirilmiş ürünler için uygun olan 100.000 parçadan fazla olması gerekir.

 

Q3: Fabrikanız kalite kontrol açısından nasıl gidiyor?
A3: Ulusal olarak ISO9001 ve ISO13485 sertifikasına sahibiz.Üretim sürecimiz, optimum ürün kalitesini sağlamak için standart prosedürlere uygundur.

 

S4: Satış sonrası hizmet nasıl sağlanır?
A4: Profesyonel çevrimiçi teknik satış sonrası hizmet sunuyoruz.Size video, telefon vb. aracılığıyla bire bir rehberlik sağlayabiliriz.

 

S5: Ödeme yöntemi nedir?
A5: T/T ile ödeme alıyoruz.

 

S6: Nasıl gönderilir?
A6: Birçok ortak taşıyıcımızdan fiyat teklifi alarak sizin için en iyi nakliye yöntemini seçin ve ayrıca gereksinimlerinize göre gönderin.