Mikotoksin Okratoksin Yem Tahılları İçin Hızlı Test Kiti 96 Kuyu/Kit Hassasiyeti 0,1 Ppb

Yem Tahıl 96 Kuyuları için Okratoksin A ELISA Test Kiti/Kit Hassasiyeti 0.1 ppb

1. İlke ve kullanım

Okratoksin, Aspergillus ve Penicillium cinsinin belirli türleri tarafından üretilen ikincil bir metabolittir.Bunlar arasında, okratoksin A, doğada en yaygın olarak bulunan ve en güçlü toksisiteye sahip olan ve insanlar, hayvanlar ve bitkiler üzerinde en büyük etkiye sahip olandır.
Kit, pirinç eriştesi, yer fıstığı ve soya fasulyesi gibi tahıllarda ve yem örneklerinde okratoksin'i (Okratoksinler A, OTA) saptamak için dolaylı rekabetçi ELISA kullanır.Kit, önceden kaplanmış antijen plakası ve enzim konjugatı, antikorlar, standartlar ve diğer destekleyici reaktiflerden oluşur.Test sırasında standart veya numune çözeltisi eklenir, numunedeki okratoksin ve okratoksin antikoruna karşı rekabet etmek için plaka üzerinde önceden kaplanmış antijen ve enzim konjugatının TMB substratı aracılığıyla eklenmesinden sonra renk gösterir, numune absorbans değerleri Okratoksin, standart eğri ile karşılaştırıldığında içeriği ile negatif bir korelasyona sahiptir ve daha sonra karşılık gelen seyreltme faktörü ile çarpıldığında, numunelerde Okratoksin içeriği çekebilir.

2. Teknik özellikler

Hassasiyet: 0.1ppb(ng/ml)

Kuluçka: 37℃, 30dk~30dk~15dk

Algılama sınırı:
Tahıl 1ppb
2 ppb besle

Çapraz reaksiyon oranı
Okratoksin A %100

Geri Dönüşüm Oranı:
Tahıl, besleme 85±15%

3. Bileşenler

4. Gerekli ancak sağlanmayan malzemeler

1) Ekipman: ELISA okuyucu (450nm/630nm), yazıcı, vorteks (çalkalayıcı isteğe bağlı), santrifüj, denge: 0.01g miktara duyarlı, dereceli pipetler, homojenleştirici;
2) Mikropipetler: tek kanallı 20ml ~ 200ml, 100ml ~ 1000ml, çok kanallı 300ml.
3) Reaktifler: Metanol, NaHCO₃ , Deiyonize su.

5. Örnek ön işlem

5.1 Numune ön işlemi öncesi çözelti hazırlığı:
1) %70 Metanol
7 kısım Metanol + 3 kısım deiyonize su;
2) 0.1M NaHCO₃ çözeltisi
4.2g NaHCO₃ tartın, 500 ml'ye çözmek için deiyonize su ekleyin;
3) Yıkama tamponu
1 kısım 20X konsantre yıkama tamponu ve 19 kısım deiyonize su ile çözülerek kullanıma hazır yıkama tamponu elde edilir.

5.2 Tahıl (pirinç, mısır, darı vb.)
1) 2 g homojen numuneyi 50 ml'lik bir santrifüj tüpüne tartın, 10 ml %70 Metanol ekleyin, 5 dakika çalkalayın, 10 dakika oda sıcaklığında 4000 r/dk'da Santrifüjleyin;
2) 1ml üst katman berrak sıvı alın, 1ml 0.1M NaHCO₃ solüsyonu ekleyin, eşit şekilde çalkalayın;
3) Test etmek için 50ul sıvı alın
Seyreltme faktörü:10 Tespit sınırı:1ppb

5.3 Yemin Hazırlanması
1) 2 g homojen numuneyi 50 ml'lik bir santrifüj tüpüne tartın, 20 ml %70 Metanol ekleyin, 5 dakika çalkalayın, 10 dakika oda sıcaklığında 4000 r/dk'da Santrifüjleyin;
2) 1ml üst katman berrak sıvı alın, 1ml 0.1M NaHCO₃ solüsyonu ekleyin, eşit şekilde çalkalayın;
3) Test etmek için 50ul sıvı alın
Seyreltme faktörü:20 Tespit sınırı:2ppb

6. ELISA prosedürleri

1) Test kitini en az 30 dakika oda sıcaklığına (20-25 ℃) getirin, 20X konsantre yıkama tamponu soğukta saklandığında kristalleşebilir, tamamen çözünmesi için oda sıcaklığına dönmesi gerekir;her reaktifin kullanımdan önce eşit şekilde çalkalanması gerektiğini unutmayın;Gerekli mikro kuyulu şeritleri plaka çerçevelerine koyun.Kullanılmayan mikroplakayı tekrar kapatın, 2-8 ℃'de saklayın, dondurmayın.
2) Numaralandırma: mikro kuyuları numunelere ve standart çözeltiye göre numaralandırın;her numune ve standart çözelti iki kopya halinde yapılmalıdır;pozisyonlarını kaydedin.
3) Standart/numune ekleyin: Ayrı çift kuyucuklara 50 µL numune veya standart solüsyon ekleyin, ardından antikor çalışma solüsyonu, 50μL/kuyucuk ekleyin.Plakayı elle sallayarak hafifçe karıştırın, mikroplakayı kapak membranıyla kapatın, karanlıkta 37°C'de 30 dakika inkübe edin.
4) Mikroplakayı yıkayın: Kapak zarını dikkatlice açın, sıvıyı mikro kuyudan boşaltın;350 µL/kuyu yıkama tamponu ekleyin, her seferinde 30 saniye olmak üzere 5 kez tamamen yıkayın, ardından çıkarın ve emici kağıt ile kurulayın. (Kuruduktan sonra kabarcığı delmek için kullanılmamış mızrak kullanın)
5) Enzim konjugatı ekleyin: Enzim konjugatı ekleyin, 100 µL/kuyu.Plakayı elle sallayarak hafifçe karıştırın, mikroplakayı kapak membranı ile kapatın, karanlıkta 37°C'de 30 dakika inkübe edin.
4. adımdaki gibi yıkayın.
6) Renklendirme: her kuyuya 50 µL substrat A ve ardından 50 μL substrat B ekleyin.Plakayı elle sallayarak hafifçe karıştırın ve renklendirme için karanlıkta 37°C'de 15 dakika inkübe edin.(Mavi renk çok açık ise reaksiyon süresi uygun şekilde uzatılabilir)
7) Belirleme: Her kuyucuğa 50 µL stop solüsyonu ekleyin.Plakayı elle sallayarak hafifçe karıştırın.Her kuyunun OD değerini belirlemek için mikroplaka okuyucunun dalga boyunu 450nm'ye ayarlayın.(10 dakika içinde çift dalga boyunda 450/630nm'de OD değerini okumanızı tavsiye ederiz).

7. Sonuç kararı

Numunelerin konsantrasyonunu hesaplamak için standart bir eğri yapılmalıdır.Standart eğri yapılmadan önce % absorbans kavramı bilinmelidir.
% absorbans hesabı:

B—örnek veya standart çözeltinin ortalama OD değeri.
B0—0 ng/mL standart solüsyonun ortalama OD değeri.
Sıfır standardı böylece %100'e eşit yapılır ve absorbans değerleri yüzde olarak belirtilir.Standartlar için hesaplanan değerler, okratoksin A konsantrasyonuna [μg/kg] karşı semilogaritmik grafik kağıdındaki bir koordinat sistemine girilir.Her numunenin absorbansına karşılık gelen μg/kg (ppb) cinsinden okratoksin A konsantrasyonu kalibrasyon eğrisinden okunabilir.
ELISA'nın sonuç analizi için özel bir yazılım, ikili veya çoklu belirlemeleri kolaylaştıracaktır.İhtiyacınız varsa, lütfen talep etmek için arayın.

8. Önlemler

1) 25 ℃'nin altındaki oda sıcaklığı veya reaktiflerin sıcaklığı ve numunelerin oda sıcaklığına (25 ℃) döndürülmemesi, daha düşük bir standart OD değerine yol açacaktır.
2) Mikroplakanın yıkama işleminde kuruluğuna lineer olmayan standart eğriler ve istenmeyen tekrarlanabilirlik gibi durumlar eşlik edecektir;bu yüzden yıkadıktan hemen sonra bir sonraki adıma geçin.
3) Herhangi bir reaktif eklemeden önce eşit şekilde karıştırın.
4) Durdurma solüsyonu 2 M sülfürik asit solüsyonudur, cilt ile temasından kaçının.
5) Son kullanma tarihi geçen kiti kullanmayınız.Kitlerden seyreltilmiş veya katkısız reaktiflerin kullanılması, duyarlılıkta ve OD değerlerinde tespitte değişikliklere yol açacaktır.Kullanılacak farklı lot numaralarına sahip kitlerdeki reaktifleri değiştirmeyin.
6) Depolama: 2-8 ℃'de saklayın, dondurmayın.Yeniden mühürlemek için kullanılmayan mikroplakayı otomatik kapanan bir torbaya koyun.Standart madde ve renksiz renk oluşturucu ışığa duyarlıdır ve bu nedenle doğrudan ışığa maruz bırakılamazlar.
7) Renklendirme solüsyonunu, bu solüsyonun dejenerasyonunu gösteren herhangi bir renkle atın.0 standart solüsyonunun (0 ppb) 0,5((A450nm<0.5)) değerinin altındaki saptama değeri(450/630nm) dejenerasyonunu gösterir.

9. Saklama ve son kullanma tarihi

Depolama: 2-8 ℃'de saklayın, dondurmayın.
Son kullanma tarihi: 12 ay;üretim tarihi kutu üzerindedir.

S1: Ne zaman sevk edilecek?
A1: Ödemeyi aldıktan sonra 7 iş günü içinde malları sizin için en kısa sürede göndeririz.(Salgın gibi dış etkenler olması durumunda teslimat gecikebilir)

S2: OEM/ODM'yi destekliyor mu?
A2: Desteklenebilir, ancak belirli miktarın özelleştirilmiş ürünler için uygun olan 100.000 parçadan fazla olması gerekir.

Q3: Fabrikanız kalite kontrol açısından nasıl gidiyor?
A3: Ulusal olarak ISO9001 ve ISO13485 sertifikasına sahibiz.Üretim sürecimiz, optimum ürün kalitesini sağlamak için standart prosedürlere uygundur.

S4: Satış sonrası hizmet nasıl sağlanır?
A4: Profesyonel çevrimiçi teknik satış sonrası hizmet sunuyoruz.Size video, telefon vb. aracılığıyla bire bir rehberlik sağlayabiliriz.

S5: Ödeme yöntemi nedir?
A5: T/T ile ödeme alıyoruz.

S6: Nasıl gönderilir?
A6: Birçok ortak taşıyıcımızdan fiyat teklifi alarak sizin için en iyi nakliye yöntemini seçin ve ayrıca gereksinimlerinize göre gönderin.