Kuş Gribi Virüsü ELISA Veteriner Test Kiti Antikor Teşhisi

Kuş Gribi Virüsü ELISA Veteriner Test Kiti Antikor Teşhisi

 

Kuş gribi Virüsü Antikoru Teşhis ELISA Kiti 96Wells/Kit ISO9001

 

1. Giriş

 

Gerçek kuş gribi veya Avrupa kuş gribi olarak da bilinen kuş gribi, asemptomatik zehirlenme ve akut bulaşıcı ölüm ile karakterize A tipi kuş gribi virüsünün (AIV) neden olduğu akut ve oldukça ölümcül bir bulaşıcı hastalıktır.

Bu ELISA kiti, tavukların, ördeklerin, hindilerin, bıldırcınların, beç tavuğunun, kazların ve diğer kümes hayvanlarının serum, plazma veya yumurta sarısındaki Avian influenza virüsü tip A antikorlarını tespit etmek için kullanılır ve bağışıklık etkisi değerlendirmesi ve yardımcı teşhis için kullanılabilir..

 

2. İlke

 

Bu kit, AIV antijeni önceden kaplanmış mikroplakalardan, antikor çalışma solüsyonundan, enzim konjugatlarından vb. oluşur. Rekabetçi ELISA'yı (bloke edici ELISA) benimser.Testi çalıştırırken önceden kaplanmış mikroplaka kuyularına seyreltilmiş numune ve antikor çalışma solüsyonu ekleyin.Numunede AIV antikoru varsa, antikor çalışma solüsyonunun mikroplaka üzerinde önceden kaplanmış AIV antijenine bağlanmasını önleyecektir.Sonuç olarak aşağıdaki adımlarda renk reaksiyonu olmaz, aksi halde renk reaksiyonu olur.Numunenin renk derinliği, numunedeki spesifik antikor içeriği ile negatif ilişkilidir.Stop solüsyonu eklendikten sonra rengi sarıya döndü.Her reaksiyon oyuğunun absorbans değeri, bir mikroplaka okuyucu ile 450 nm'de ölçülmüştür.Böylece numunede kuş gribi virüsü (AIV) tip A antikorlarının olup olmadığını anlayabiliriz.

 

3. Bileşenler

 

kod	İsim	1X96T	2X96T
1	AIV antijen kaplı mikroplaka	96T×1	96T×2
2	Enzim konjugatı (kırmızı kapak)	11ml×1	11ml×2
3	Antikor çalışma solüsyonu (mavi kapaklı)	5.5ml×1	11ml×1
4	20x Konsantre yıkama tamponu	40ml×1	40ml×1
5	Substrat A (beyaz kapak)	6ml×1	11ml×1
6	Substrat B (siyah kapak)	6ml×1	11ml×1
7	Stop solüsyonu (sarı kapak)	6ml×1	11ml×1
8	Pozitif kontrol (kırmızı kapak)	1,0 ml×1	1,5 ml×1
9	Negatif kontrol (yeşil sınır)	1,0 ml×1	1,5 ml×1
10	Yapışkan Folyo	1 parça	2 parça
11	Talimat	1 parça	1 parça

 

 

4. Gereken ancak sağlanmayan malzemeler

 

1) mikroplaka okuyucu (450/630 nm dalga boyları dahil).

2) Ayarlanabilir Mikropipetler

3) 37 ℃ sabit sıcaklık ekipmanı

 

5. Numune Hazırlama

 

1) Kullanmadan önce 20x Konsantre Yıkama Tamponunu oda sıcaklığına (yaklaşık 25°C) getirin, çökelen tuzları çözmek için çalkalayın ve ardından 20x distile veya deiyonize suyla seyreltin.

2) Serum/plazma: Hayvanların tam kanını alın ve geleneksel yöntemlere göre serum veya plazma alın.Serum/plazma, hemoliz ve kirlilik olmaksızın berraklaştırılmalıdır.Numuneler kısa süreli saklama için (1 hafta içinde) 2~8°C'de ve uzun süreli saklama için -20°C'de saklanabilir.

Yumurta sarısı: 2 ml taze yumurta sarısı alın, 2 ml fizyolojik salin ekleyin, iyice çalkalayın, 3000 dev/dak'da 15 dakika santrifüjleyin ve süpernatantı numune olarak alın.

3) Serum, plazma veya hazırlanmış yumurta sarısı örneklerini seyreltilmiş yıkama tamponuyla 5 kat seyreltin (örn. 40 ul seyreltilmiş yıkama tamponuna 10 ul numune ekleyin ve iyice karıştırın).Pozitif ve negatif kontroller seyreltme gerektirmez.

 

6. Test prosedürü

 

1) Kiti kullanmadan önce 30 dakika oda sıcaklığına getirin.

2) Gerekli sayıda mikroplaka kuyucuğu alın, 2 negatif kontrol kuyusu ve 2 pozitif kontrol kuyusu ayarlayın, kullanılmayan kuyucukları kapatın ve mümkün olan en kısa sürede 2~8°C'de saklayın.

3) Negatif kontrol, negatif kontrole eklenir, 50ul/çukur, pozitif kontrol, pozitif kontrole eklenir, 50ul/kuyu;numune kuyucuğu seyreltilmiş numuneye 50ul/kuyu eklenir;

4) Her kuyucuğa 50ul/kuyu antikor çalışma solüsyonu ekleyin.İyice karıştırın ve 37°C'de 30 dakika inkübe edin.

5) Kuyucuklardaki sıvıyı boşaltın, tüm kuyucukları yıkama solüsyonu ile doldurun, 30 saniye inkübe edin ve atın.Yukarıdaki gibi yıkama prosedürünü 5 kez tekrarlayın ve kurulayın.

6) Her kuyuya 100ul/kuyu enzim konjugatı ekleyin.37°C'de 30 dakika inkübe edin.

7) Yıkama adımı 5).

8) Her kuyucuğa Substrat A: 50ul/kuyu ekleyin, ardından Substrat B: 50ul/kuyu ekleyin, iyice karıştırın ve karanlıkta 15 dakika 37°C'de inkübe edin.

9) Durdurma solüsyonu ekleyin: kuyu başına 50ul/kuyu, iyice karıştırın ve her kuyucuğun A değerini 450nm'de ölçmek için ELISA Reader kullanın (referans 630nm'dir).

 

7. Sonuçlar

 

1) Normal koşullar altında, negatif kontrol kuyusunun A değeri 1,0'dan büyük veya ona eşittir;

2) Normal koşullar altında, pozitif kontrol kuyusunun A değeri ≤ negatif kontrol kuyusunun A değeri × %50;

3) PI (bloke etme oranı) = (1-örnek değeri/negatif kontrol ortalaması) X %100,PI ≥ %50: pozitif;PI < %50: negatif

4) Aşılanmamış sürüler: Pozitif sonuçlar enfeksiyon içerebilir ve bunun klinik verilerle birlikte analiz edilmesi gerekir.

5) Bağışıklık sürüleri: Bu sırada numunelerin antikor seviyesini izleyin ve kaydedin ve sonuçlara göre sürülerin antikor seviyelerinin ve bağışıklık durumundaki değişikliklerin dağılımını analiz edin.

 

8. Kısıtlamalar

 

Bu kit, AIV antikorlarını yalnızca kalitatif olarak saptayabilir.Güçlü, orta ve zayıf antikor seviyeleri kabaca PI değerine göre değerlendirildi.

 

9. Notlar

 

1) Çalışma sırasında eldiven ve iş elbisesi giyin ve kesinlikle dezenfeksiyon ve izolasyon sistemini uygulayın.Çeşitli deneysel atıklar kirletici olarak muamele edilmelidir

2) Durdurma solüsyonu aşındırıcıdır.Cilt ve giysilerle temasından kaçının.Temas oluşursa, musluk suyu ile durulayın.

3) Soğutucudan çıkarılan mikroplakalar, oda sıcaklığında kuruluğa dengelenmeli ve kullanılmayan mikroplakalar kurutucu ile kapatılmalıdır.

4) Yıkama sıvısının düşük sıcaklıkta kristalleşmesi kolaydır ve kullanıldığında oda sıcaklığında çözünecektir.

5) Kuyusuz enzimlerin yıkama başarısızlığını önlemek için her kuyucuğa yeterince yıkama tamponu ekleyin

6) Test numuneleri taze olmalıdır.

7) Test sonuçlarının belirlenmesi bir ELISA okuyucusuna dayanmalıdır.

8) Farklı gruplardan reaktifleri karıştırmayın.

 

Özellikler: 5X96, 2X96, 1X96 delik/kit.

Geçerlilik: 12 ay.

Depolama: 2-8 ℃, ışıktan uzak tutun.

Mikroplakaları ambalajı açıldıktan sonra 2 ay boyunca nemden koruyarak 2-8°C'de saklayın.

 

Kuş gribi virüsü (AIV), influenza A virüsüne aittir.İnfluenza virüsleri, A, B ve C olmak üzere üç türe ayrılan RNA virüslerinin Orthomyxoviridae familyasına aittir. Bunların arasında, influenza A virüsü esas olarak kuşlarda görülür ve bazı influenza A virüsleri domuzları, atları, fokları, balinaları da enfekte edebilir. ve diğer memeliler ve insanlar;İnfluenza B ve C virüsleri sırasıyla foklarda ve domuzlarda bulunur.
İnfluenza A virüsünün neden olduğu, solunum sisteminden ciddi sistemik sepsise kadar birçok semptomu olan, kümes hayvanlarında viral influenzayı ifade eder.Kuş gribinin kuşlar arasında yayılması kolaydır.Eskiden halk arasında “tavuk vebası” olarak biliniyordu.Uluslararası Veterinerlik Epidemiyoloji Bürosu, onu A Sınıfı bulaşıcı hastalık olarak sınıflandırmıştır.Kuş gribi, sırasıyla 1994, 1997, 1999 ve 2003'te Avustralya, İtalya, Hong Kong, Hollanda ve diğer yerlerde ve 2005'te ağırlıklı olarak Güneydoğu Asya ve Avrupa'da patlak verdi.

 

Kuş gribi virüsünün önlenmesi

Kuş gribi genellikle ilkbahar ve kış aylarında görülür ve genellikle insandan insana bulaşmaz.Kuş gribinden korunmada aşağıdaki hususlara dikkat edilmelidir: a.Salgın bölgesine seyahat etmemek için ellerinizi sık sık yıkayın, kümes hayvanlarının salgılarından uzak tutun ve kuş, kuş veya kuş pisliği ile temasta ellerinizi dezenfektan ve temiz su ile iyice temizleyin;B. İyi kişisel hijyen alışkanlıkları geliştirin, öksürürken ağzınızı ellerinizle veya tuvalet kağıdıyla kapatın, evdeki hava sirkülasyonunu güçlendirin, pencereyi günde bir veya iki kez yarım saat açın, yeterince uyuyun ve dinlenin, dengeli beslenin ve ödeme yapın C vitamini açısından zengin gıdaları ve diğer bağışıklığı güçlendiren gıdaları daha fazla tüketmeye dikkat edin;C. Kanatlı eti pişirilmeli ve iyice pişirilmelidir.Yumurta yerken önce yumurta kabuğu akan su ile yıkanmalı ve pişirme tam olarak ısıtılmalıdır.Çiğ veya yarı çiğ yumurta yemeyin.

 

 

Q1: göndermeniz ne kadar sürer?
A1: Genellikle 7 iş günü içinde gönderilir.

 

S2: OEM/ODM'yi destekliyor musunuz?
A2: desteklenebilir.Özel ihtiyaçlarınıza ve belirli miktarlara göre özelleştirebiliriz.

 

S3: Fabrikanız kalite kontrol açısından ne durumda?
A3: ISO9001 sertifikasına ve ISO13485 sertifikasına sahibiz, şu ana kadar tüm üretim süreci, standart kurallarımız var, hükümetin ilgili davranış ve yasalarına uyuyoruz.

 

S4: Satış sonrası servis garantili mi?
A4: Profesyonel çevrimiçi teknik satış sonrası hizmet sağlıyoruz.Ürün deney sırasında başarısız olursa, sağlayabiliriz
telefon, video ve diğer formlar aracılığıyla birebir rehberlik.

 

S5: Minimum sipariş miktarınız nedir?
A5: 1 Kit.

 

Q6: nakliye yöntemi nedir?
Y6: Ekspres (FEDEX, UPS, DHL, EMS, vb.) veya hava ve kara yoluyla gönderilebilir. Lütfen sipariş vermeden önce bizimle onaylayın.