Süt Yumurta İdrar Serum Testi için Beta Agonist ELISA Kiti Tavuk Domuz 96 Kuyu/Kit

Süt için Beta Agonist ELISA Kiti Yumurta İdrar Serum Tavuk Domuz Eti 96 Kuyu/Kit

 

1. İlke

β-agonistleri test kiti, numunedeki β-agonistlerin tespiti için rekabetçi enzim immünoanalizini temel alır.Birleştirme antijeni, mikro kuyucuklu şeritler üzerinde önceden kaplanmıştır.Numunedeki β-agonistleri ve mikro kuyucuk şeritleri üzerine önceden kaplanmış kuplaj antijenleri, anti-β-agonist antikorları için rekabet eder.Enzim konjugatının eklenmesinden sonra, renklendirme için TMB substratı eklenir.Numunenin optik yoğunluk (OD) değeri, numunedeki β-agonistleri ile negatif bir korelasyona sahiptir.Bu değer, standart eğri ile karşılaştırılır ve ardından β-agonist kalıntıları elde edilir.

 

2. Teknik özellikler

Hassasiyet: 0.1 ppb
Kuluçka Sıcaklığı: 25℃
Kuluçka Süresi: 30dk～15dk

Algılama sınırı:
Domuz idrarı 0.3ppb
domuz eti 0.6ppb

Çapraz reaksiyon oranı: Clenbuterol %100, Cimaterol < %4, Brombuterol %60, Mabuterol %108, Bambuterol < %5, Klorprenalin < %1, Salbutamol %75, Terbutalin %25, Penbutolol %19, Tulobuterol %23, Fenoterol < %0.1, Raktopamin <0.1%

Geri Dönüşüm Oranı:
Domuz idrarı, domuz eti %90±30

 

3. Bileşenler

 

1	Mikro kuyu şeritleri	8 çıkarılabilir ile 12 şerit her biri kuyu
2	6 × standart solüsyon (her biri 1 mL)	0ppb	0.1 ppb
		0,3 ppb	0.9 ppb
		2,7 ppb	8.1 ppb
3	enzim eşleniği	7ml	kırmızı şapka
4	Antikor çalışma çözümü	10ml	Mavi şapka
5	Yüzey A	7ml	Beyaz şapka
6	SubstratB	7ml	siyah kap
7	Çözümü durdur	7ml	sarı şapka
8	20x konsantre yıkama tamponu	40ml	Beyaz şapka
9	5 × numune çıkarma solüsyonu	50ml	şeffaf kapak

 

4. Gerekli ancak sağlanmayan malzemeler

1) Ekipmanlar:mikroplaka okuyucu, yazıcı, homojenizatör, vorteks, osilatör, santrifüj, İnkübatör, ölçüm pipetleri, terazi (0,01 g karşılıklı hassasiyet)
2) Mikropipetörler: tek kanallı 20-200µL, 100-1000µL ve çok kanallı 30-300µL;
3) Reaktifler: NaOH, HCI.

 

5. Örnek ön işlem

Talimatlar (Ön işlemden önce aşağıdaki noktalar ele alınmalıdır)
1) Deneyler için sadece tek kullanımlık uçlar kullanılabilir ve farklı reaktifleri absorbe etmek için kullanıldığında uçların değiştirilmesi gerekir;
2) Deneyden önce, deney sonuçlarına müdahale eden kontaminasyonu önlemek için her deney aleti temiz olmalı ve gerekirse yeniden temizlenmelidir.

Numune ön muamelesinden önce çözelti hazırlığı:
1) 0.2M HC1: 17.2mL HC1'i deiyonize su içinde 1L'ye çözün.
2) İM NaOH: 4g NaOH'yi deiyonize su içinde 100 mL'ye çözün.
3) Numune çıkarma solüsyonu: 1 kısım 5X numune çıkarma solüsyonu + 4 kısım deiyonize su, eşit şekilde karıştırın.

5.1 Domuz idrarı
20 µL berrak idrar alın, doğrudan tespit edin (İdrar çamurluysa, 4000 r/dk'da 10 dakika boyunca filtrelemeli veya santrifüj etmeli, ardından temiz idrarı alın).Kullanmayacaksanız donmuş ortamda saklayınız.
Numune seyreltme katı: 1

5.2 domuz eti
1. 2±0.05g homojenize doku örneğini 50ml'lik bir santrifüj tüpüne tartın, 3ml 0.2M HCl ekleyin, 3 dakika çalkalayın.
2. Ardından 600ul 1M NaOH solüsyonu ve 2.4ml Numune ekstraksiyon solüsyonu ekleyin, 3 dakika çalkalayın, 4000 r/dk'da oda sıcaklığında (20-25 ℃) 10 dakika santrifüjleyin.
3. Analiz için 20µL üst katman sıvısı alın. (Not: Santrifüjden sonra yağ tabakası varsa, yağ tabakasını çıkarın veya yağ tabakasını ayırın, analiz için berrak sıvı alın)
Numune seyreltme katı: 4

 

6. ELISA prosedürleri

6.1Talimatlar
1. Kullanmadan önce tüm reaktifleri ve mikro kuyulu stripleri oda sıcaklığına (20-25 ℃) getirin;
2. Kullanımdan hemen sonra tüm reaktifleri 2-8 ℃'ye döndürün;
3. ELISA analizinin tekrarlanabilirliği, büyük ölçüde, plaka yıkamanın kıvamına bağlıdır.Plaka yıkamanın doğru çalışması ELISA prosedürlerinde kilit noktadır;
4. Sabit sıcaklıklarda inkübasyon için, tüm numuneler ve reaktifler ışığa maruz kalmaktan kaçınmalıdır ve her mikroplaka kapak membranı ile kapatılmalıdır.

6.2 Çalıştırma prosedürleri
1. Test kitini en az 30 dakika oda sıcaklığına (20-25 ℃) getirin, kullanımdan önce her reaktifin eşit şekilde çalkalanması gerektiğini unutmayın;
2. Gerekli mikro kuyulu stripleri plaka çerçevelerine koyun.2-8 ℃'de saklanan kullanılmayan mikroplaka yeniden mühürlendi, dondurulmadı.
3. 40ml 20X konsantre yıkama tamponunu 1:19 oranında deiyonize suyla seyreltin (1 kısım 20X konsantre yıkama tamponu + 19 kısım deiyonize su).Veya gerekli miktarda hazırlayın.
4. Numaralandırma: mikro kuyuları numunelere ve standart çözeltiye göre numaralandırın;her numune ve standart çözelti iki kopya halinde yapılmalıdır;pozisyonlarını kaydedin.
5. Ayrı çift kuyucuklara 20µL numune veya standart solüsyon ekleyin, ardından enzim konjugatı, 50ul/kuyucuk ekleyin;sonra antikor çalışma solüsyonu, 80µL/kuyu ekleyin.Plakayı elle sallayarak hafifçe karıştırın, mikroplakayı kapak membranı ile kapatın, 25 ℃'de 30 dakika inkübe edin.
6. Sıvıyı mikro kuyudan boşaltın, 250µL/kuyu yıkama tamponu ekleyin, 4-5 kez, her seferinde 15-30 saniye yıkayın, ardından çıkarın ve emici kağıt ile kurulayın (çırptıktan sonra kabarcıklar varsa, onları kesin). temiz ipuçları ile).
7. Renklendirme: 50µL substrat A ekleyin, ardından her kuyucuğa 50μL substrat B ekleyin.Plakayı elle sallayarak hafifçe karıştırın ve renklendirme için karanlıkta 25 ℃'de 15 dakika inkübe edin.
8. Belirleme: Her kuyucuğa 50µL stop solüsyonu ekleyin.Plakayı elle sallayarak hafifçe karıştırın.Her kuyunun OD değerini belirlemek için mikroplaka okuyucunun dalga boyunu 450nm'ye ayarlayın.(5 dakika içinde çift dalga boyunda 450/630nm'de OD değerini okumanızı tavsiye ederiz).

 

7. Sonuç kararı

Sonuçları yargılamak için iki yöntem vardır;birincisi kaba bir yargı, ikincisi ise niceliksel belirlemedir.Numunenin OD değerinin numunedeki β-agonist konsantrasyonu ile negatif bir korelasyona sahip olduğuna dikkat edin.

7.1 Niteliksel belirleme
Numunenin ortalama OD değerinin standart çözeltininkiyle karşılaştırılmasından elde edilen konsantrasyon aralığı (ng/mL).Numunenin Ⅰ OD değerinin 0,3 ve numunenin Ⅱ'nin 1,0 olduğunu varsayarsak, standart çözeltilerin OD değeri: 0ppb için 2.243, 0.1ppb için 1.816, 0.3ppb için 1.415, 0.9ppb için 0.74, için 0,313'tür. 2,7ppb, 8,1ppb için 0,155, buna göre numunenin Ⅰ konsantrasyon aralığı 2,7 ila 8,1 ppb'dir ve numunenin Ⅱ, 0,3 ila 0,9 ppb'dir.

7.2 Nicel belirleme
Numunenin ve standart çözeltinin ortalama OD değeri (B) için elde edilen absorbans değerlerinin ortalama değerleri, birinci standart çözeltinin (0 standart) OD değerine (B0) bölünür ve ardından %100 ile çarpılır, yani

 

Absorbans değerinin yüzdesi =	B	×100%
	B0

 

B—örnek veya standart çözeltinin ortalama (çift kuyu) OD değeri
B0—0 ng/mL standart solüsyonun ortalama OD değeri
Standart çözeltilerin absorpsiyon yüzdeleri ve β-agonistlerin standart çözeltilerinin (ng/mL) semilogaritma değerleri ile standart eğriyi sırasıyla Y- ve X ekseni olarak çizin.Absorpsiyon yüzdesini standart eğriye dahil ederek standart eğriden numunenin karşılık gelen konsantrasyonunu okuyun.Elde edilen değer daha sonra seyreltme katıyla çarpılır ve son olarak numunede β-agonist konsantrasyonu elde edilir.

 

8. Önlemler

1. 25 ℃'nin altındaki oda sıcaklığı veya reaktiflerin sıcaklığı ve numunelerin oda sıcaklığına (20-25 ℃) döndürülmemesi, daha düşük bir standart OD değerine yol açacaktır.
2. Mikroplakanın yıkama işleminde kuruluğuna, lineer olmayan standart eğriler ve istenmeyen tekrarlanabilirlik gibi durumlar eşlik edecektir;Bu yüzden yıkadıktan hemen sonra bir sonraki adıma geçin.
3. Eşit şekilde karıştırın, aksi takdirde istenmeyen tekrarlanabilirlik olacaktır.
4. Durdurma solüsyonu 2 M sülfürik asit solüsyonudur, cilt ile temasından kaçının.
5. Son kullanma tarihi geçen kiti kullanmayınız.Kitlerden seyreltilmiş veya katkısız reaktiflerin kullanılması, duyarlılıkta ve OD değerlerinde tespitte değişikliklere yol açacaktır.Kullanılacak farklı lot numaralarına sahip kitlerdeki reaktifleri değiştirmeyin.
6. Yeniden mühürlemek için kullanılmayan mikroplakayı otomatik kapanan bir torbaya koyun.Standart madde ve renksiz renk oluşturucu ışığa duyarlıdır ve bu nedenle doğrudan ışığa maruz bırakılamazlar.
7. Bu solüsyonun dejenerasyonunu gösteren herhangi bir renkle renklendirme solüsyonunu atın.0 standart solüsyonunun (0 ppb) 0,5'ten küçük saptama değeri, dejenerasyonunu gösterir.
8. Optimum reaksiyon sıcaklığı 25 ℃'dir ve çok yüksek veya çok düşük sıcaklıklar, algılama hassasiyeti ve OD değerlerinde değişikliklere neden olacaktır.

 

9. Saklama ve son kullanma tarihi

Depolama: 2-8 ℃'de saklayın, dondurmayın.
Son kullanma tarihi: 12 ay;üretim tarihi kutu üzerindedir.
Açıklamalar: Mikrotitre plakalarının vakum paketinde sızıntı varsa, mikrotitre plakası normal ve etkilidir, deney sonucunu etkilemez.Lütfen kullanmaktan çekinmeyin.

 

 

 

 

 

S1: Ne zaman sevk edilecek?
A1: Ödemeyi aldıktan sonra 7 iş günü içinde malları sizin için en kısa sürede göndeririz.(Salgın gibi dış etkenler olması durumunda teslimat gecikebilir)

 

S2: OEM/ODM'yi destekliyor mu?
A2: Desteklenebilir, ancak belirli miktarın özelleştirilmiş ürünler için uygun olan 100.000 parçadan fazla olması gerekir.

 

Q3: Fabrikanız kalite kontrol açısından nasıl gidiyor?
A3: Ulusal olarak ISO9001 ve ISO13485 sertifikasına sahibiz.Üretim sürecimiz, optimum ürün kalitesini sağlamak için standart prosedürlere uygundur.

 

S4: Satış sonrası hizmet nasıl sağlanır?
A4: Profesyonel çevrimiçi teknik satış sonrası hizmet sunuyoruz.Size video, telefon vb. aracılığıyla bire bir rehberlik sağlayabiliriz.

 

S5: Ödeme yöntemi nedir?
A5: T/T ile ödeme alıyoruz.

 

S6: Nasıl gönderilir?
A6: Birçok ortak taşıyıcımızdan fiyat teklifi alarak sizin için en iyi nakliye yöntemini seçin ve ayrıca gereksinimlerinize göre gönderin.