Bal için Metronidazol ELISA Antikor Hızlı Tespit Kiti 96 Kuyu/Kit Hassasiyeti 0,05 Ppb

Bal 96 Kuyuları için Metronidazol ELISA Test Kiti/Kit Duyarlılığı 0,05 ppb

1. İlke

Bu test kiti, numunede Metronidazol tespiti için rekabetçi enzim immünoanalizine dayanmaktadır.Birleştirme antijenleri, mikro-kuyulu şeritler üzerinde önceden kaplanmıştır.Numunedeki Metronidazol ve mikro kuyucuk şeritleri üzerine önceden kaplanmış kuplaj antijenleri, Metronidazol karşıtı antikorlar için rekabet eder.Enzim konjugatının eklenmesinden sonra, renklendirme için TMB substratı eklenir.Numunenin optik yoğunluk (OD) değeri, içindeki Metronidazol ile negatif bir korelasyona sahiptir.Bu değer standart eğri ile karşılaştırılır ve ardından Metronidazol konsantrasyonu elde edilir.

2. Teknik özellikler

Hassasiyet: 0.05ppb
Algılama sınırı
Bal: yaklaşık 0.1ppb
Not: ppb= ng/ml veya ng/g

Çapraz reaksiyon oranı:
Metronidazol %100
Ornidazol %83
Seknidazol %110
Metronidazol-OH <%1
Tinidazol <%1
Dimetridazol <%1

Kurtarma oranı: 90±30%
 

3. Bileşenler

4. Gerekli ancak sağlanmayan malzemeler

1) Ekipmanlar: mikroplaka okuyucu (450nm, 630nm), yazıcı, nitrojen kurutma cihazı, vorteks, çalkalayıcı, santrifüj (3000g ve üzeri), ölçüm pipetleri, terazi (0,01 g karşılıklı hassasiyet), inkübatör (4℃,25℃) ), su banyosu, zamanlayıcı;
2) Mikropipetörler: tek kanallı 20-200 µL, 100-1000 µL ve sekiz kanallı 30-300 µl;
3) Reaktifler (AR): Na2HPO4▪12H2O,NaH2PO4·2H2O,Etil asetat, Heksan, deiyonize su.

5. Örnek ön işlem

Talimatlar
Her türlü numunenin ön işleme tabi tutulmasından önce aşağıdaki noktalara dikkat edilmelidir:
1) Deneyler için sadece tek kullanımlık uçlar kullanılabilir ve farklı reaktifleri absorbe etmek için kullanıldığında uçların değiştirilmesi gerekir;
2) Deneyden önce her deney ekipmanı temiz olmalı ve deney sonuçlarına müdahale eden kontaminasyonu önlemek için gerekirse tekrar temizlenmelidir.

Numune ön muamelesinden önce çözelti hazırlığı:
1) Yıkama tamponu: 1 kısım 20× konsantre yıkama tamponu + 19 kısım deiyonize su.
2) 0.2M Fosfat tamponu: 25.8g Na2HPO4▪12H2O, 4.350g NaH2PO4·2H2O tartın, tamamen çözünmesi için 500ml deiyonize su ekleyin.
 

5.1 Numune hazırlama
Bal
1) 2.0± 0.05g bal örneğini 50ml plastik santrifüj tüpüne tartın;
2) 2ml 0.2M Fosfat tamponu ekleyin, ardından 8ml Etil asetat ekleyin, numuneyi organik faz ile tamamen temas ettirmek için 5 dakika kuvvetlice çalkalayın (veya 3 dakika vorteks kullanın);
3) 3000 g'ın üzerinde oda sıcaklığında 5 dakika santrifüjleyin;
4) 4 ml üst katman berrak sıvıyı 5 ml santrifüj tüpüne aktarın (not: alt katman su fazını almayın), 50-60 ℃ su banyosunda kurumaya bırakın;
5) Uygun şekilde 1ml Heksan ve 0.5ml Yeniden Çözülen solüsyon ekleyin, 2 dakika kuvvetlice çalkalayın (veya 1 dakika vorteks kullanın);
6) 3000 g'ın üzerinde oda sıcaklığında 5 dakika santrifüjleyin;
7) Üst katman organik fazını atın, test etmek için 50ul alt katman sıvısı alın.
Numunenin seyreltme katı: 0,5

6. ELISA prosedürleri

6.1 Talimatlar
1) Kullanmadan önce tüm reaktifleri ve mikro kuyucuklu stripleri oda sıcaklığına (20-25 ℃) getirin;
2) Kullanımdan hemen sonra tüm reaktifleri 2-8 ℃'ye döndürün;
3) ELISA analizinin tekrarlanabilirliği, büyük ölçüde, plaka yıkamanın kıvamına bağlıdır.Plaka yıkamanın doğru çalışması ELISA prosedürlerinde kilit noktadır;
4) Sabit sıcaklıklarda inkübasyon için, tüm numuneler ve reaktifler ışığa maruz kalmamalı ve her mikroplaka kapak membranı ile kapatılmalıdır.

6.2 İşletim prosedürleri
1. Test kitini en az 30 dakika oda sıcaklığına (20-25 ℃) getirin, kullanımdan önce her reaktifin eşit şekilde karışması için çalkalanması gerektiğini unutmayın, gerekli mikro kuyulu stripleri plaka çerçevelerine koyun.Kullanılmayan mikroplakayı tekrar kapatın, 2-8 ℃'de saklayın, dondurmayın.
2. Numaralandırma: mikro kuyuları numunelere ve standart çözeltiye göre numaralandırın;her numune ve standart çözelti iki kopya halinde yapılmalı, konumlarını kaydetmelidir.
3. Ayrı çift kuyucuklara 50 µL numune veya standart solüsyon ekleyin;sonra her kuyuya 50 µL antikor çalışma solüsyonu ekleyin, plakayı elle sallayarak hafifçe karıştırın.Mikroplakayı kapak membranıyla kapatın ve karanlıkta 4 ℃'de 60 dakika inkübe edin.
4. Mikrokuyudan sıvıyı boşaltın, mikroplakayı 15-30 sn yıkamak için 250 µL/kuyu yıkama tamponu ekleyin, ardından yıkama tamponunu mikro kuyudan dökün, bu şekilde yıkamak için yıkama tamponunu 3-4 kez ekleyin, ardından çıkarın ve emici kağıtla kurulayın.
5. 100ul enzim konjugatı ekleyin (mikroplakanın kurumasını önlemek için yıkama adımından sonra mikroplakayı uzun süre oda sıcaklığında tutmayın), plakayı elle sallayarak hafifçe karıştırın.Mikroplakayı kapak membranı ile kapatın ve karanlıkta 25 ℃'de 20 dakika inkübe edin.4. adım olarak yıkama.
6. Renklendirme: her bir kuyucuğa 100ul substrat A solüsyonu ve substrat B solüsyonu karışımı ekleyin (Not: substrat A solüsyonu ve substrat B solüsyonunu 1:1'de karıştırın, karışımı 10 dakika içinde kullanın, içermek veya karıştırmak için metal kullanmayın, geçersiz alt tabakadan kaçının).Plakayı elle sallayarak hafifçe karıştırın, mikroplakayı kapak membranı ile kapatın ve renklenme için karanlıkta 25 ℃'de 15 dakika inkübe edin.
7. Belirleme: Her kuyucuğa 50 µL durdurma solüsyonu ekleyin.Plakayı elle sallayarak hafifçe karıştırın.Alt tabaka rengi maviden sarıya döndüğünde başarıyla durdurun.OD değerini 5 dakika içinde çift dalga boyunda 450/630 nm'de okumanızı tavsiye ederiz.

7. Sonuç kararı

Sonuçları yargılamak için iki yöntem vardır: birincisi kabaca değerlendirme, ikincisi ise nicel belirlemedir.Numunenin OD değerinin Metronidazol konsantrasyonu ile negatif bir korelasyona sahip olduğuna dikkat edin.

7.1 Niteliksel belirleme
Metronidazolün konsantrasyon aralığı (ng/mL), örneğin ortalama OD değerinin standart çözeltininkiyle karşılaştırılmasıyla elde edilebilir.NumuneninⅠ OD değerinin 0,3 ve numuneninⅡ değerinin 1,0 olduğunu varsayarsak, standart çözeltilerin OD değeri: 0ppb için 2.243, 0.05ppb için 1.816, 0.15ppb için 1.415, 0.45ppb için 0.74, 1.35ppb için 0.313'tür. , 4.05ppb için 0.155, buna göre numunenin konsantrasyon aralığıⅠ 1,35 ila 4,05ppb ve numuneninⅡ konsantrasyon aralığı 0,05 ila 0,45ppb'dir.

7.2 Nicel belirleme
Absorbans değerlerinin ortalama değerleri, numunenin ve standart solüsyonun ortalama OD değeri (B) için elde edilir ve birinci standart solüsyonun (0 standart) OD değerine (B0) bölünür ve ardından %100 ile çarpılır, yani ,

B—örnek veya standart çözeltinin ortalama OD değeri
B0—0 ng/mL standart solüsyonun ortalama OD değeri
Standart çözeltinin absorpsiyon yüzdeleri ve Metronidazol standart çözeltisinin (ng/mL) semilogaritma değerleri ile standart eğriyi sırasıyla Y ve X ekseni olarak çizin.Absorpsiyon yüzdesini standart eğriye dahil ederek standart eğriden numunenin karşılık gelen konsantrasyonunu okuyun.Elde edilen değer daha sonra karşılık gelen seyreltme katıyla çarpılır ve son olarak numunedeki Metronidazol konsantrasyonu elde edilir.
Bu kitin profesyonel analiz yazılımını kullanmak, büyük miktarda numunenin doğru ve hızlı analizi için daha uygun olacaktır.(Bu yazılım için lütfen bizimle iletişime geçin).

8. Önlemler

1. 25 ℃'nin altındaki oda sıcaklığı veya reaktiflerin sıcaklığı ve numunelerin oda sıcaklığına (20-25 ℃) döndürülmemesi, daha düşük bir standart OD değerine yol açacaktır.
2. Mikroplakanın yıkama işlemindeki kuruluğuna, doğrusal olmayan standart eğriler ve istenmeyen tekrarlanabilirlik gibi durumlar eşlik edecektir;Bu yüzden yıkadıktan hemen sonra bir sonraki adıma geçin.
3. Eşit şekilde karıştırın, aksi takdirde istenmeyen tekrarlanabilirlik olacaktır.
4. Durdurma solüsyonu 2 M sülfürik asit solüsyonudur, cilt ile temasından kaçının.
5. Son kullanma tarihi geçen kiti kullanmayınız.Kitlerden seyreltilmiş veya katkısız reaktiflerin kullanılması, duyarlılıkta ve OD değerlerinde tespitte değişikliklere yol açacaktır.Kullanılacak farklı lotların kitlerinden reaktifleri değiştirmeyin.
6. Yeniden mühürlemek için kullanılmayan mikroplakayı otomatik kapanan bir torbaya koyun.Standart solüsyon ve renksiz renk oluşturucu ışığa duyarlıdır ve bu nedenle doğrudan ışığa maruz bırakılamazlar.
7. Bu solüsyonun dejenerasyonunu gösteren herhangi bir renkle renklendirme solüsyonunu atın.0,5'ten küçük standart çözelti 1(0 ppb)'nin saptama değeri, dejenerasyonunu gösterir.

9. Saklama ve son kullanma tarihi

Depolama: 2-8 ℃'de saklayın, dondurmayın.
Son kullanma tarihi: 12 ay;üretim tarihi kutu üzerindedir.

S1: Ne zaman sevk edilecek?
A1: Ödemeyi aldıktan sonra 7 iş günü içinde malları sizin için en kısa sürede göndeririz.(Salgın gibi dış etkenler olması durumunda teslimat gecikebilir)

S2: OEM/ODM'yi destekliyor mu?
A2: Desteklenebilir, ancak belirli miktarın özelleştirilmiş ürünler için uygun olan 100.000 parçadan fazla olması gerekir.

Q3: Fabrikanız kalite kontrol açısından nasıl gidiyor?
A3: Ulusal olarak ISO9001 ve ISO13485 sertifikasına sahibiz.Üretim sürecimiz, optimum ürün kalitesini sağlamak için standart prosedürlere uygundur.

S4: Satış sonrası hizmet nasıl sağlanır?
A4: Profesyonel çevrimiçi teknik satış sonrası hizmet sunuyoruz.Size video, telefon vb. aracılığıyla bire bir rehberlik sağlayabiliriz.

S5: Ödeme yöntemi nedir?
A5: T/T ile ödeme alıyoruz.

S6: Nasıl gönderilir?
A6: Birçok ortak taşıyıcımızdan fiyat teklifi alarak sizin için en iyi nakliye yöntemini seçin ve ayrıca gereksinimlerinize göre gönderin.