Feniletanolamin Süt Yumurta İdrar Serum Yemi 96 Kuyu/Kit için ELISA Test Kiti

Feniletanolamin Süt Yumurta İdrar Serum Besleme 96 Kuyu/Kit için ELISA Test Kiti

 

1. İlke

Test kiti, numunede Feniletanolamin A'nın saptanması için rekabetçi enzim immünoanalizine dayanmaktadır.Konjuge antijen, mikro kuyucuklu şeritler üzerinde önceden kaplanmıştır.Örnekteki Feniletanolamin A ve mikro kuyucuk şeritleri üzerine önceden kaplanmış birleştirme antijenleri, anti-Feniletanolamin A antikorları için rekabet eder.Enzim konjugatının eklenmesinden sonra, renklendirme için TMB substratı eklenir.Numunenin optik yoğunluk (OD) değeri, numunedeki Feniletanolamin A konsantrasyonu ile negatif bir korelasyona sahiptir.Değer, standart eğri ile karşılaştırılır ve daha sonra Feniletanolamin A konsantrasyonu elde edilir.

 

2. Teknik özellikler

Hassasiyet: 0.1 ppb
İnkübatör sıcaklığı: 25 ℃
İnkübatör süresi: 30dk～15dk

Algılama sınırı
Doku 0.2 ppb
0,5 ppb besleme

Çapraz reaksiyonlar:
Feniletanolamin A %100
Raktopamin <%1
Salbutamol <%1
Clenbuterol <%1
Geri Dönüşüm Oranı
Doku, besleme 85±25%

 

3. Bileşenler

 

1	Mikro kuyu şeritleri	8 çıkarılabilir ile 12 şerit her biri kuyu
2	6× standart solüsyon (her biri 1 mL)	0ppb	0.1 ppb
		0,3 ppb	0.9 ppb
		2,7 ppb	8.1 ppb
3	enzim eşleniği	7ml	kırmızı şapka
4	Antikor çalışma çözümü	7ml	Mavi şapka
5	Yüzey A	7ml	Beyaz şapka
6	SubstratB	7ml	siyah kap
7	Çözümü durdur	7ml	sarı şapka
8	20x konsantre yıkama tamponu	40ml	Beyaz şapka
9	2 × konsantre yeniden çözünen çözelti	50ml	şeffaf kapak

 

4. Gerekli ancak sağlanmayan malzemeler

1) Ekipmanlar: mikroplaka okuyucu, yazıcı, homojenleştirici, nitrojen kurutma cihazı, osilatör, santrifüj, ölçüm pipetleri, terazi (0.01 g karşılıklı hassasiyet), inkübatör.
2) Mikropipetörler: tek kanallı 20-200 µL ve 100-1000 µL ve çok kanallı 30-300 µL;
3) Reaktifler: Etil asetat, N-heksan, Glasiyel asetik asit

 

5. Örnek ön işlem

Talimatlar (Ön işlemden önce aşağıdaki noktalar ele alınmalıdır)
1) Deneyler için sadece tek kullanımlık uçlar kullanılabilir ve farklı reaktifleri absorbe etmek için kullanıldığında uçların değiştirilmesi gerekir;
2) Deneyden önce, deney sonuçlarına müdahale eden kontaminasyonu önlemek için her deney aleti temiz olmalı ve gerekirse yeniden temizlenmelidir.

Numune ön muamelesinden önce çözelti hazırlığı:
1) Örnek özütleme solüsyonu: 99 ml etil asetat alın, 1 ml buzlu asetik asit ekleyin ve iyice karıştırın.
2) Numune yeniden çözündürme solüsyonu: 2x konsantre yeniden çözündürme solüsyonu, numunenin yeniden çözündürülmesi için kullanılan 1:1 oranında deiyonize su ile (1mL konsantre yeniden çözündürme solüsyonu + 1mL deiyonize su) seyreltilir.

Numune hazırlama
5.1 Besleme
1. Öğütülmüş numune, 1.0±0.05g'yi 50ml'lik bir santrifüj tüpüne alın;
2. 10 mL Numune çıkarma solüsyonu ekleyin, osilatör ile 3 dakika çalkalayın;
3. Oda sıcaklığında 4000 r/dk'da 10 dakika santrifüjleyin;
4. 2 ml süpernatanı alın, nitrojen veya hava ile üfleyerek 50-60 ℃'de kurutun;
5. 1 ml N-heksan ekleyin, ardından 1 ml Numune yeniden çözünen solüsyonu ekleyin, 30 saniye çalkalayın;
6. Oda sıcaklığında 10 dakika boyunca 4000 rpm'de santrifüjleyin, üst tabaka organik fazını çıkarın.
7. Analiz için 20 µL alt katman alın.
Numune seyreltme katı: 5
(Numune bozulması olduğu için, numune CUT OFF değeri olarak 2PPB önerilir.)

5.2 Doku
1. 50 ml'lik bir santrifüj tüpüne homojen doku numunesi 2.0±0.05g alın;
2. 8 mL Numune çıkarma solüsyonu ekleyin, osilatör ile 2 dakika çalkalayın;
3. 10 dakika boyunca oda sıcaklığında 4000 rpm'de santrifüjleyin;
4. 2 ml süpernatantı alın, nitrojen veya hava ile üfleyerek 50-60℃'de kurutun;
5. 1 ml N-heksan ekleyin, ardından 1 ml Numune yeniden çözünen solüsyonu ekleyin, 30 saniye çalkalayın;
6. 10 dakika boyunca oda sıcaklığında 4000 r/dk'da santrifüjleyin, üst tabaka organik fazını çıkarın.
7. Analiz için 20 µL alt katmanı alın.
Numunenin seyreltme katı: 2
(Numune bozulması olduğu için numune CUT OFF değeri olarak 1PPB önerilir.)

 

6. ELISA prosedürleri

6.1Talimatlar
1. Kullanmadan önce tüm reaktifleri ve mikro kuyulu stripleri oda sıcaklığına (20-25 ℃) getirin.
2. Kullanımdan hemen sonra tüm reaktifleri 2-8 ℃'ye döndürün.
3. ELISA analizinin tekrarlanabilirliği, büyük ölçüde, plaka yıkamanın kıvamına bağlıdır.Plaka yıkamanın doğru çalışması ELISA prosedürlerinde kilit noktadır.
4. Sabit sıcaklıklarda inkübasyon için, tüm numuneler ve reaktifler ışığa maruz kalmaktan kaçınmalıdır ve her mikroplaka kapak membranı ile kapatılmalıdır.

6.2 Çalıştırma prosedürleri
1. Test kitini en az 30 dakika oda sıcaklığına (20-25 ℃) getirin, kullanımdan önce her sıvı reaktifin eşit şekilde karışması için çalkalanması gerektiğini unutmayın.
2. Çözelti hazırlama: 40ml 20x konsantre yıkama tamponunu 1:19 oranında deiyonize su ile (1 kısım 20x konsantre yıkama tamponu + 19 kısım deiyonize su) seyreltin veya gereken miktarda hazırlayın.
3. Gerekli mikro kuyulu stripleri plaka çerçevelerine koyun.2-8 ℃'de saklanan kullanılmayan mikroplaka yeniden mühürlendi, dondurulmadı.
4. Numaralandırma: mikro kuyuları numunelere ve standart çözeltiye göre numaralandırın;her numune ve standart çözelti iki kopya halinde yapılmalıdır;pozisyonlarını kaydedin.
5. Ayrı çift kuyucuklara 50 µL numune veya standart solüsyon ekleyin;50 µL enzim konjugatı ekleyin, ardından her kuyuya 50 µL antikor çalışma solüsyonu ekleyin, mikroplakayı kapak membranıyla kapatın ve 25 ℃'de 30 dakika inkübe edin.
6. Sıvıyı mikro kuyudan boşaltın, emici kağıt üzerinde kuruması için kapağı kapatın;250 µL/kuyucuk deiyonize su ekleyin, 15-30 saniye yıkayın, ardından çıkarın ve emici kağıt ile kurulayın, 4-5 kez tekrarlayın.
7. Renklendirme: Her kuyucuğa 50 µL substrat A solüsyonu, 50 µL B solüsyonu ekleyin.Plakayı elle sallayarak hafifçe karıştırın ve renklenmesi için 25 ℃'de 15 dakika karanlıkta inkübe edin.
8. Belirleme: Her kuyucuğa 50 µL durdurma solüsyonu ekleyin.Plakayı elle sallayarak hafifçe karıştırın.Her kuyunun OD değerini belirlemek için mikroplaka okuyucunun dalga boyunu 450 nm'ye ayarlayın.(5 dakika içinde çift dalga boyunda 450/630 nm'de OD değerini okumanızı tavsiye ederiz).

 

7. Sonuç kararı

Sonuçları yargılamak için iki yöntem vardır;birincisi kaba bir yargı, ikincisi ise niceliksel belirlemedir.Numunenin OD değerinin numunedeki Feniletanolamin A ile negatif bir korelasyonu olduğuna dikkat edin.

7.1 Niteliksel belirleme
Konsantrasyon aralığı (ng/mL), örneğin ortalama OD değeri ile standart çözeltininki karşılaştırılarak elde edilebilir.Numunenin OD değerinin 0,3 ve numuneninⅡ değerinin 1,0 olduğunu varsayarsak, standart çözeltilerin OD değeri: 0ppb için 2.243, 0.1ppb için 1.866, 0.3ppb için 1.415, 0.9ppb için 0.864, 2.7ppb için 0.413'tür. , 8.1ppb için 0.155, buna göre numunenin konsantrasyon aralığıⅠ 0,3 ila 0,9ppb ve numuneninⅡ konsantrasyon aralığı 2,7ppb ila 8,1 ppb'dir.

7.2 Nicel belirleme
Numunenin ve standart çözeltinin ortalama OD değeri (B) için elde edilen absorbans değerlerinin ortalama değerleri, birinci standart çözeltinin (0 standart) OD değerine (B0) bölünür ve ardından %100 ile çarpılır, yani

 

Absorbans değerinin yüzdesi =	B	×100%
	B0

 

B—örnek veya standart çözeltinin ortalama OD değeri
B0—0 ng/mL standart solüsyonun ortalama OD değeri
Standart çözeltilerin absorpsiyon yüzdeleri ve Feniletanolamin A standart çözeltilerinin (ng/mL) semilogaritma değerleri ile standart eğriyi sırasıyla Y ve X ekseni olarak çizin.Absorpsiyon yüzdesini standart eğriye dahil ederek standart eğriden numunenin karşılık gelen konsantrasyonunu okuyun.Elde edilen değer daha sonra karşılık gelen seyreltme katıyla çarpılır ve son olarak numunedeki gerçek Feniletanolamin A konsantrasyonu elde edilir.
Bu kitin profesyonel analiz yazılımını kullanmak, büyük miktarda numunenin doğru ve hızlı analizi için daha uygun olacaktır.(Bu yazılım için lütfen bizimle iletişime geçin)

8. Önlemler

1. 25 ℃'nin altındaki oda sıcaklığı veya reaktiflerin sıcaklığı ve numunelerin oda sıcaklığına (20-25 ℃) döndürülmemesi, daha düşük bir standart OD değerine yol açacaktır.
2. Mikroplakanın yıkama işlemindeki kuruluğuna, doğrusal olmayan standart eğriler ve istenmeyen tekrarlanabilirlik gibi durumlar eşlik edecektir;Bu yüzden yıkadıktan hemen sonra bir sonraki adıma geçin.
3. Eşit şekilde karıştırın, plakayı tamamen yıkayın, ELISA analizinin tekrarlanabilirliği büyük ölçüde plaka yıkamanın kıvamına bağlıdır.
4. Durdurma solüsyonu 2 M sülfürik asit solüsyonudur, cilt ile temasından kaçının.
5. Son kullanma tarihi geçen kiti kullanmayınız.Kitlerden seyreltilmiş veya katkısız reaktiflerin kullanılması, duyarlılıkta ve OD değerlerinde tespitte değişikliklere yol açacaktır.Kullanılacak farklı lot numaralarına sahip kitlerdeki reaktifleri değiştirmeyin.
6. Yeniden mühürlemek için kullanılmayan mikroplakayı otomatik kapanan bir torbaya koyun.Standart madde ve renksiz renk oluşturucu ışığa duyarlıdır ve bu nedenle doğrudan ışığa maruz bırakılamazlar.
7. Bu solüsyonun dejenerasyonunu gösteren herhangi bir renkle renklendirme solüsyonunu atın.0,5'ten küçük (A450 nm< 0,5) 0 standart solutinin saptama değeri, dejenerasyonunu gösterir.
8. Optimum reaksiyon sıcaklığı 25 ℃'dir ve çok yüksek veya düşük sıcaklıklar, algılama hassasiyeti ve OD değerlerinde değişikliklere neden olacaktır.

9. Saklama ve son kullanma tarihi

Depolama: 2-8 ℃'de saklayın, dondurmayın.
Son kullanma tarihi: 12 ay;üretim tarihi kutu üzerindedir.
Not: Mikroplakanın Vakum paketinde sızıntı varsa, kullanımı hala geçerlidir, test sonucunu etkilemez, kullanmak için rahat olun.

 

 

 

 

 

S1: Ne zaman sevk edilecek?
A1: Ödemeyi aldıktan sonra 7 iş günü içinde malları sizin için en kısa sürede göndeririz.(Salgın gibi dış etkenler olması durumunda teslimat gecikebilir)

 

S2: OEM/ODM'yi destekliyor mu?
A2: Desteklenebilir, ancak belirli miktarın özelleştirilmiş ürünler için uygun olan 100.000 parçadan fazla olması gerekir.

 

Q3: Fabrikanız kalite kontrol açısından nasıl gidiyor?
A3: Ulusal olarak ISO9001 ve ISO13485 sertifikasına sahibiz.Üretim sürecimiz, optimum ürün kalitesini sağlamak için standart prosedürlere uygundur.

 

S4: Satış sonrası hizmet nasıl sağlanır?
A4: Profesyonel çevrimiçi teknik satış sonrası hizmet sunuyoruz.Size video, telefon vb. aracılığıyla bire bir rehberlik sağlayabiliriz.

 

S5: Ödeme yöntemi nedir?
A5: T/T ile ödeme alıyoruz.

 

S6: Nasıl gönderilir?
A6: Birçok ortak taşıyıcımızdan fiyat teklifi alarak sizin için en iyi nakliye yöntemini seçin ve ayrıca gereksinimlerinize göre gönderin.