Tavuk Domuz Ördeği için Amantadin Teşhis ELISA Kiti 96 Kuyu/Kit Hassasiyeti 0,2 Ppb

Tavuk Domuz Ördek için Amantadin ELISA Test Kiti 96 Kuyu/Kit Hassasiyet 0,2 ppb

 

1. İlke

Bu test kiti, Amantadin'in saptanması için rekabetçi enzim immünolojik testine dayanmaktadır.Kuplaj antijeni, mikro kuyulu şeritler üzerinde önceden kaplanmıştır.Numunedeki Amantadin ve mikro-kuyu şeritleri üzerinde önceden kaplanmış birleştirme antijenleri, anti-Amantadin antikorları için yarışır.Enzim konjugatının eklenmesinden sonra, renklendirme için TMB substratı eklenir.Numunenin optik yoğunluk (OD) değeri, numunedeki Amantadin ile negatif bir korelasyona sahiptir.Bu değer, standart eğri ile karşılaştırılır ve akabinde Amantadin kalıntıları elde edilir.

 

2. Teknik özellikler

Hassasiyet: 0.2ppb
İnkübatör sıcaklığı: 25 ℃
İnkübatör süresi: 30dk~15dk

Algılama sınırı:
Tavuk, ördek 0,2 ppb

Çapraz reaksiyon oranı:
Amantadin %100

Geri Dönüşüm Oranı:
Tavuk, ördek %90±25

 

3. Bileşenler

 

1	Mikro kuyu şeritleri	Her biri 8 çıkarılabilir hazneye sahip 12 strip
2	6× standart solüsyon (her biri 1 mL)	0ppb	0.2ppb
		0.8ppb	3.2ppb
		12.8ppb	51.2ppb
3	enzim konjugatı	7ml	kırmızı şapka
4	Antikor çalışma çözümü	7ml	Mavi şapka
5	Substrat A	7ml	Beyaz şapka
6	SubstratB	7ml	siyah şapka
7	Çözümü durdur	7ml	sarı bere
8	özütleyici	50ml*2	şeffaf kapak
9	20× konsantre yıkama tamponu	15ml	Beyaz şapka
10	5× konsantre yeniden çözme solüsyonu	10ml	Beyaz şapka

 

4. Gereken ancak sağlanmayan malzemeler

 

1) Ekipman: ELISA Reader (450 nm/630nm), homojenleştirici, çalkalayıcı, santrifüj, terazi: 0,01g miktara duyarlı, nitrojen kurutma cihazı, inkübatör, dereceli pipetler, yazıcı

2) Mikropipetler: tek kanallı 20ml ~ 200ml, 100ml ~ 1000ml, çok kanallı 30~300 μl

3) Reaktifler: Asetonitril, n-heksan.

 

5. Örnek ön işlem

 

Talimatlar (Ön işlemden önce aşağıdaki hususlara dikkat edilmelidir)

1) Deneyler için sadece tek kullanımlık uçlar kullanılabilir ve farklı reaktifleri absorbe etmek için kullanıldığında uçlar değiştirilmelidir;

2) Deneyden önce, deney sonuçlarına müdahale eden kontaminasyonu önlemek için her deney malzemesi temiz olmalı ve gerekirse yeniden temizlenmelidir.

 

Numune ön işleminden önce çözelti hazırlama:

1) Örnek ekstrakt solüsyonu

6 kısım Asetonitril + 1 kısım Ekstrakt, kullanıma hazır örnek ekstrakt solüsyonu elde etmek için.

2) Numune yeniden çözme çözümü

1 kısım konsantre yeniden çözme solüsyonu (5X) kullanın ve 4 kısım deiyonize su ile çözünerek kullanıma hazır örnek yeniden çözme solüsyonu elde edin.

Numune Hazırlama

 

5.1 Tavuk, ördek örneğinin hazırlanması

1) 3,0±0,05g homojenleştirilmiş doku örneğini 50 ml'lik santrifüj tüpüne alın;6ml numune ekstraktı solüsyonu ekleyin, 3 dakika çalkalayın, 4000r/dak'nın üzerinde oda sıcaklığında (20 - 25 ℃) 5 dakika santrifüjleyin;

2) 2 ml temiz organik fazı kuru bir kaba alın, nitrojen veya hava ile 50~60 ℃'de üfleyerek kurutun;

3) Önce 1 ml n-heksan ekleyin, ardından 0,5 ml Numune yeniden eritme solüsyonu ekleyin, 30 saniye karıştırın, oda sıcaklığında (20 - 25°C) 4000 dev/dak'nın üzerinde 5 dakika santrifüjleyin, üst tabaka n-heksanı atın;

4) Test etmek için alt tabaka sıvısını 50μl alın

Seyreltme faktörü:0.5

 

6. ELISA prosedürleri

 

6.1Talimatlar

1. Kullanmadan önce ELISA reaktiflerini oda sıcaklığına (20 - 25 °C) getirin.

2. ELISA reaktiflerini kullanımdan hemen sonra 2-8 °C'ye geri koyun

3. Analiz sürecinde ELISA tekrar üretilebilirliği büyük ölçüde yıkama plakasının kıvamına bağlıdır, doğru yıkama plakası işlemi ELISA programını belirleme noktasıdır.

4. Tüm sabit sıcaklıkta inkübasyon sürecinde, ışığa maruz kalmaktan kaçının, mikroplakayı kapak membranı ile kapatın

 

6. 2 Çalıştırma prosedürleri

1. Test kitini en az 30 dakika oda sıcaklığına (20-25 ℃) getirin, her reaktifin kullanımdan önce eşit şekilde çalkalanması gerektiğini unutmayın;

2. Gerekli mikro kuyu şeritlerini plaka çerçevelerine koyun.Kullanılmayan mikroplakayı yeniden mühürledi, 2-8 ℃'de saklandı, dondurulmadı.

3. Çözelti hazırlama: 15ml 20x konsantre yıkama tamponunu deiyonize suyla 300ml'ye seyreltin.

4. Numaralandırma: numunelere ve standart çözeltiye göre mikro kuyucukları numaralandırın;her numune ve standart solüsyon iki kopya halinde yapılmalıdır;konumlarını kaydedin.

5. Standart/örnek ekleyin: 50 µL numune veya standart solüsyonu ayrı iki kuyucuğa ekleyin, ardından enzim konjugatı ekleyin, 50 µL/kuyu;sonra antikor çalışma solüsyonu, 50 uL/kuyu.Plakayı elle sallayarak hafifçe karıştırın, mikroplakayı kapak membranı ile kapatın, karanlıkta 30 dakika 25 °C'de inkübe edin.

6. Mikroplakayı yıkayın: Kapak zarını dikkatlice açın, sıvıyı mikrokuyudan boşaltın;250 µL/kuyu seyreltilmiş yıkama tamponu ekleyin, 4-5 kez, her seferinde 15-30 s tamamen yıkayın, ardından çıkarın ve emici kağıtla kurutmak için kanat açın. (Kuruduktan sonra balonu delmek için kullanılmayan mızrak kullanın)

7. Renklendirme: Her kuyucuğa 50 µL substrat A solüsyonu ve ardından 50 µL B solüsyonu ekleyin.Plakayı elle sallayarak hafifçe karıştırın ve renklenmesi için karanlıkta 25 °C'de 15 dakika inkübe edin.

8. Tayin: Her kuyucuğa 50 µL stop solüsyonu ekleyin.Plakayı elle sallayarak hafifçe karıştırın.Her kuyunun OD değerini belirlemek için mikroplaka okuyucunun dalga boyunu 450nm'ye ayarlayın.(5 dakika içinde çift dalga boyu 450/630 nm'de OD değerini okumanızı öneririz).

 

7. Sonuç değerlendirmesi

Sonuçları değerlendirmenin iki yöntemi vardır;birincisi kaba muhakeme, ikincisi ise nicel tespittir.Numunenin OD değerinin numunedeki Amantadin ile negatif bir korelasyona sahip olduğuna dikkat edin.

7.1 Niteliksel belirleme
Konsantrasyon aralığı (ng/ml), ortalama absorbans değeri standartlarla karşılaştırılarak elde edilebilir.Birinci Numunenin absorbans değerinin 0,3, İkinci Numunenin 1,0 olduğunu ve standartların: 0ppb of 2,243 olduğunu varsayalım;2,054'ün 0,2 ppb'si;1,715'in 0,8 ppb'si;1,074'ün 3,2 ppb'si;0,451'in 12,8 ppb'si;0,155'in 51,2 ppb'si.Daha sonra numunenin konsantrasyonu 12.8 ppb ~ 51.2 ppb aralığındadır;İkinci Örnek 3,2 ppb ~ 12,8 ppb'dir.Numunelerdeki Amantadin konsantrasyon aralığı, numunenin ilgili dilüsyonu ile çarpılarak elde edilebilir.
 

7. 2 Kantitatif Analiz
Numunelerin konsantrasyonunu hesaplamak için standart bir eğri yapılmalıdır.Standart eğri yapılmadan önce % absorbans kavramı bilinmelidir.
% Absorbans hesaplanması:

 

Absorbans değerinin yüzdesi =	B	×100%
	B0

 

B—örnek veya standart çözeltinin ortalama OD değeri
B0—0 ng/mL standart solüsyonun ortalama OD değeri
Böylece sıfır standardı %100'e eşit yapılır ve soğurma değerleri yüzde olarak verilir.Standartlar için hesaplanan değerler, Amantadin konsantrasyonuna [ng/mL] karşı yarı logaritmik grafik kağıdı üzerindeki bir koordinat sistemine girilir.Her numunenin absorbansına karşılık gelen ng/mL (ppb) cinsinden Amantadin konsantrasyonu, kalibrasyon eğrisinden okunabilir.
ELISA'nın sonuç analizi için özel bir yazılım, ikili veya çoklu belirlemeleri kolaylaştıracaktır.İhtiyacınız varsa, lütfen talep etmek için arayın.

 

8. Önlemler

 

1. Oda sıcaklığı 25°C'den düşükse veya reaktif sıcaklığı ve numune oda sıcaklığına (20-25°C) dönmediyse standart OD değeri düşük olacaktır.
2. Mikroplaka yıkama işlemi sırasında kurutulur, buna standart eğrinin doğrusal olmaması ve zayıf tekrar üretilebilirlik eşlik eder;bu nedenle, yıkamadan hemen sonra bir sonraki adıma geçin.
3. Herhangi bir reaktif eklemeden önce iyice karıştırın.
4. Durdurma solüsyonu 2M sülfürik asit solüsyonudur, cilt ile temasından kaçının.
5. Kiti son kullanma tarihinden sonra kullanmayın.Kitten seyreltilmiş veya karıştırılmış reaktiflerin kullanılması, hassasiyet ve saptama OD değerlerinde değişikliklere neden olabilir.Farklı kit partilerindeki reaktifleri değiştirmeyin.
6. Saklama: 2-8°C'de saklayın, dondurmayın.Kullanılmayan mikroplakaları kendinden kapanan torbalarda yeniden kapatın.Standart malzemeler ve renksiz kuplörler ışığa duyarlıdır ve doğrudan ışığa maruz kalamazlar.
7. Rengi solüsyonun bozulduğunu gösteren renklendirme solüsyonlarını atın.0 standart çözeltinin (0 ppb) saptama değeri (450/630nm) 0,5'ten ((A450nm<0,5)) düşüktür ve bu, denatürasyonunu gösterir.
8. Optimum reaksiyon sıcaklığı 25°C'dir.Sıcaklık çok yüksek veya çok düşükse algılama hassasiyeti ve OD değeri değişecektir.

 

9. Saklama ve son kullanma tarihi

Depolama: 2-8 ℃'de saklayın, dondurmayın.
Son kullanma tarihi: 12 ay;üretim tarihi kutunun üzerindedir.
Not: Mikroplakanın Vakum paketinde sızıntı varsa, kullanım hala geçerlidir, test sonucunu etkilemez, rahat kullanın.

 

 

 

 

 

S1: Ne zaman sevk edilecek?
A1: Ödemeyi aldıktan sonra 7 iş günü içinde malları sizin için mümkün olan en kısa sürede göndeririz.(Salgın gibi dış etkenlerde teslimat gecikebilir)

 

S2: OEM/ODM'yi destekliyor mu?
A2: Desteklenebilir, ancak belirli miktarın, özelleştirilmiş ürünler için uygun olan 100.000'den fazla parça olması gerekir.

 

S3: Fabrikanız kalite kontrol açısından ne durumda?
A3: Ulusal olarak ISO9001 ve ISO13485 sertifikasına sahibiz.Üretim sürecimiz, optimum ürün kalitesini sağlamak için standart prosedürlere uygundur.

 

S4: Satış sonrası hizmet nasıl sağlanır?
A4: Profesyonel çevrimiçi teknik satış sonrası hizmet sunuyoruz.Size video, telefon vb. Yoluyla bire bir rehberlik sağlayabiliriz.

 

Q5: ödeme yöntemi nedir?
A5: T/T ile ödeme alıyoruz.

 

Q6: nasıl gönderilir?
A6: Pek çok işbirlikçi taşıyıcımızdan fiyat teklifi alarak sizin için en iyi nakliye yöntemini seçin ve ayrıca gereksinimlerinize göre gönderin.