Tavuk Domuz Ördek için MQCA Teşhis ELISA Kiti 96 Kuyu/Kit Hassasiyeti 0,5 Ppb

Tavuk Domuz Ördek için MQCA ELISA Test Kiti 96 Kuyu/Kit Hassasiyet 0,5 ppb

 

1. İlke

Bu test kiti, numunede MQCA'nın saptanması için rekabetçi enzim immunoassay'e dayalıdır.Eşleştirme antijenleri, mikro kuyulu şeritler üzerinde önceden kaplanmıştır.Numunedeki MQCA ve mikro-kuyu şeritleri üzerine önceden kaplanmış birleştirme antijenleri, anti-MQCA antikoru için rekabet eder.Enzim konjugatının eklenmesinden sonra, renklendirme için TMB substratı eklenir.Numunenin optik yoğunluk (OD) değeri, içindeki MQCA ile negatif bir korelasyona sahiptir.Bu değer, standart eğri ile karşılaştırılır ve daha sonra MQCA konsantrasyonu elde edilir.

 

2. Teknik özellikler

Hassasiyet: 0,5 ppb
İnkübatör sıcaklığı: 25 ℃
İnkübatör süresi: 30dk~15dk

Algılama sınırı:
Doku 1 ppb

Çapraz reaksiyon oranı:
MQCA %100
Olaquindox <%0,1
Geri Dönüşüm Oranı:
Doku %85±%10

 

3. Bileşenler

 

1	Mikro kuyu şeritleri	Her biri 8 çıkarılabilir hazneye sahip 12 strip
2	6× standart solüsyon (her biri 1 mL)	0 puan	0,5 puan
		1,5 puan	4,5 puan
		13,5 sayı	40.5 ppb
3	Konsantre Enzim konjugatı	1 ml	kırmızı şapka
4	Antikor çalışma çözümü	8 ml	Mavi şapka
5	Substrat A	7 ml	Beyaz şapka
6	SubstratB	7 mi	siyah şapka
7	Çözümü durdur	7 ml	sarı bere
8	Yeniden çözme çözümü	50 mi	şeffaf kapak
9	20× konsantre yıkama tamponu	40 mi	Beyaz şapka

 

4. Gereken ancak sağlanmayan malzemeler

1) Ekipmanlar: mikroplaka okuyucu (450 nm / 630 nm), homojenleştirici, osilatör, santrifüj, ölçüm pipetleri, nitrojen kurutma cihazı ve terazi (0.01 g'lık bir duyarlılık karşılığı), İnkübatör.
2) Mikropipetçiler: tek kanallı 20 - 200 µL ve 100 - 1000 µL ve çok kanallı 30~300 µl;
3) Reaktifler: Etil asetat, n-heksan, HCI, NaCl, CH3CN

 

5. Örnek ön işlem

Talimatlar
Herhangi bir numunenin ön işlemine tabi tutulmadan önce aşağıdaki hususlara dikkat edilmelidir:
1) Deneyler için sadece tek kullanımlık uçlar kullanılabilir ve farklı reaktifleri absorbe etmek için kullanıldığında uçlar değiştirilmelidir;
2) Deneyden önce, deney sonuçlarına müdahale eden kontaminasyonu önlemek için her bir deney malzemesinin temiz olduğu kontrol edilmeli ve gerekirse yeniden temizlenmelidir.

örnek hazırlama
1) Numune özü (1 ay boyunca 2~8°C'de saklayın): 8,6 ml konsantre HCl alın, 500 ml'ye kadar deiyonize su ekleyin, ardından numune özü elde etmek için 10 g NaCl ekleyin.

5.1 Çiftlik hayvanları ve kümes hayvanları dokusu (Tavuk, ördek, domuz eti):
1. 2± 0,05 g homojenleştirilmiş numuneyi 50 ml'lik santrifüj tüpüne alın;
2. 4 mL Numune özü ekleyin, 1 dakika iyice çalkalayın;
3. 4ml Etil asetat ve 2ml CH3CN ekleyin, 10 saniye boyunca uygun şekilde çalkalayın;4000 dev/dk'da oda sıcaklığında (20 - 25 ℃) 10 dakika santrifüjleyin (Not: Bu adım yalnızca 10 saniye çalkalamaya ihtiyaç duyar, çok uzun çalkalama Emülsifikasyona yol açar, eğer Emülsifikasyon ortaya çıkarsa, belirli bir süpernatant alın, ardından tüpü 5 saniye hafifçe çalkalayın , tekrar santrifüjleyin, ardından yeterince süpernatan alabilirsiniz);
4. 3 mL üst katman organik fazını temiz bir kaba alın, aşağıda Azot veya hava ile kurutun.
56 ℃ su banyosu;
5. 1 ml N-heksan ekleyin, 30 saniye çalkalayın, ardından 0,5 ml Yeniden Çözünen solüsyon ekleyin, çalkalayın ve 30 saniye iyice karıştırın;4000 rpm'de oda sıcaklığında (20-25 ℃) 5 dakika santrifüjleyin.
6. Üst katmandaki organik fazı çıkarın. Analiz için alt katmanı 50 µL alın.
Numunenin seyreltme katı: 0,5

 

6. ELISA prosedürleri

6.1 Talimatlar
1) Kullanmadan önce tüm reaktifleri ve mikro kuyucuklu stripleri oda sıcaklığına (20-25 ℃) getirin;
2) Kullanımdan hemen sonra tüm reaktifleri 2-8 ℃'ye getirin;
3) ELISA analizinin tekrar üretilebilirliği, büyük ölçüde plaka yıkamanın tutarlılığına bağlıdır.Plaka yıkamanın doğru çalışması ELISA prosedürlerinde kilit noktadır;
4) Sabit sıcaklıklarda inkübasyon için tüm numuneler ve reaktifler ışığa maruz kalmamalı ve her bir mikroplaka kapak membranı ile kapatılmalıdır.

6.2 Çalıştırma prosedürleri
1) Gerekli tüm reaktifleri çıkarın ve oda sıcaklığında (20-25 ℃) en az 30 dakika bekletin.Kullanmadan önce her reaktifin eşit şekilde karışması için çalkalanması gerektiğini unutmayın;
2) Gerekli mikro kuyu şeritlerini ve plaka çerçevelerini alın.Kullanılmayan mikroplakayı yeniden mühürledi, 2-8 ℃'de sakladı;
3) Çözelti hazırlama: 40 mL 20x konsantre yıkama tamponunu 1:19'da deiyonize su ile seyreltin (1 kısım 20x konsantre yıkama tamponu + 19 kısım deiyonize su) veya gerektiği kadar hazırlayın;
4) Numaralandırma: numunelere ve standart çözeltiye göre mikro kuyucukları numaralandırın;her numune ve standart solüsyon iki kopya halinde yapılmalıdır;konumlarını kaydedin;
5) Antikor çalışma solüsyonu ve Konsantre Enzim konjugatından oluşan karışım solüsyonu hazırlayın: Antikor çalışma solüsyonu ve Konsantre Enzim konjugatını 10:1 oranında eşit şekilde karıştırın (1000ul antikor çalışma solüsyonu + 100ul Konsantre Enzim konjugatı, bu karışım solüsyonu bir kez hazırlandıktan sonra kullanılmalıdır, kullanılamaz saklanabilir, paket miktarında fazlalık vardır, orantılı olarak hazırlayınız.)
6) İkili kuyucukları ayırmak için 20 µL numune veya standart solüsyon ekleyin, ardından her kuyucuğa 70 µL antikor çalışma solüsyonu ve Konsantre Enzim konjugatı karışımı solüsyonu ekleyin.Hafifçe çalkalayarak karıştırın, mikroplakayı kapak zarı ile kapatın ve 25°C'de karanlıkta 30 dakika inkübe edin;
7) Mikroplakayı 250 µL/kuyucukta yıkama tamponu ile dört ila beş kez yıkayın;Kuyuyu 15-30 saniye yıkama tamponu ile ıslatın, emici kağıtla kurulayın (çırptıktan sonra kabarcıklar varsa temiz uçlarla kesin);
8) Renklendirme: Her kuyucuğa 50 µL substrat A solüsyonu ve 50 µL B solüsyonu ekleyin.Hafifçe çalkalayarak karıştırın ve renklendirme için karanlıkta 25 ℃'de 15 dakika inkübe edin;
9) Tayin: Her bir kuyucuğa 50 µL stop solüsyonu ekleyin.Hafifçe sallayarak karıştırın.OD değerini belirlemek için mikroplaka okuyucunun dalga boyunu 450 nm'ye ayarlayın.(5 dakika içinde çift dalga boyu 450/630 nm'de OD değerini okumanızı öneririz) .

 

7. Sonuç değerlendirmesi

Sonuçları değerlendirmenin iki yöntemi vardır;birincisi kaba muhakeme, ikincisi ise nicel tespittir.Numunenin OD değerinin MQCA içeriği ile negatif bir korelasyona sahip olduğuna dikkat edin.

7.1 Niteliksel belirleme
Konsantrasyon aralığı (ng/mL), numunenin ortalama OD değeri ile standart çözeltininki karşılaştırılarak elde edilebilir.Ⅰ örneğinin OD değerinin 0,3 ve Ⅱ örneğinin OD değerinin 1,0 olduğu varsayıldığında, standart çözeltilerin 0 ppb için 2,043, 0,5 ppb için 1,716, 1,5 ppb için 1,215, 4,5 için 0,74 olduğu varsayılmıştır. ppb, 13,5 ppb için 0,313 ve 40,5 ppb için 0,155, buna göre numuneninⅠ konsantrasyon aralığı 13,5 ila 40,5 ppb'dir ve numune Ⅱ'ninki 1,5 ila 4,5 ppb'dir.

7.2 Nicel belirleme
Absorbans değerlerinin ortalama değerleri, örneğin ve standart çözeltinin ortalama OD değerinin (B) yüzdesinin ilk standart çözeltinin (0 standart) OD değerine (B0) bölünmesi ve ardından %100 ile çarpılmasına eşdeğerdir , yani,

 

Absorbans değerinin yüzdesi =	B	×100%
	B0

 

 

B— numunenin veya standart çözeltinin ortalama (çift kuyu) OD değeri
B0—0 ng/mL standart solüsyonun ortalama OD değeri
Sırasıyla Y ve X ekseni olarak standart solüsyonların absorpsiyon yüzdelerini ve MQCA standart solüsyonlarının semilogaritma değerlerini (ng/mL) içeren standart eğriyi çizin.Absorpsiyon yüzdesini standart eğriye dahil ederek standart eğriden numunenin karşılık gelen konsantrasyonunu okuyun.Ortaya çıkan değer daha sonra karşılık gelen seyreltme katıyla çarpılır, böylece numunede nihai olarak MQCA konsantrasyonu elde edilir.
Bu kitin profesyonel analiz yazılımını kullanmak, büyük miktarda numunenin doğru ve hızlı analizi için daha uygun olacaktır.(Bu yazılım için lütfen bizimle iletişime geçiniz)

 

8. Önlemler

1. 25 ℃ altındaki oda sıcaklığı veya reaktiflerin sıcaklığı ve numunelerin oda sıcaklığına (20-25 ℃) döndürülmemesi, daha düşük bir standart OD değerine yol açacaktır.
2. Yıkama işleminde mikroplakanın kuruluğuna, doğrusal olmayan standart eğriler ve istenmeyen tekrarlanabilirlik gibi durumlar eşlik edecektir.
3. Her reaktifi ve reaksiyon karışımını eşit şekilde karıştırın ve mikroplakayı iyice yıkayın, aksi halde istenmeyen tekrarlanabilirlik olacaktır.
4. Durdurma solüsyonu 2 M sülfürik asit solüsyonudur, cilt ile temasından kaçının;
5. Kullanılmayan mikroplakayı yeniden mühürlemek için otomatik kapanan bir torbaya koyun.Standart madde ve renksiz renk oluşturucu ışığa duyarlıdır ve bu nedenle doğrudan ışığa maruz kalamazlar.
6. Son kullanma tarihi geçen kiti kullanmayınız.Kitlerden seyreltilmiş veya tağşiş edilmiş reaktiflerin kullanılması, hassasiyette ve saptanan OD değerlerinde değişikliklere yol açacaktır.Kullanmak için farklı lot numaralarına sahip kitlerdeki reaktifleri değiştirmeyin.
7. Renklendirme solüsyonunu, bu solüsyonun dejenerasyonunu gösteren herhangi bir renkle atın.0 standart çözümünün 0,5'ten düşük tespit değeri, onun dejenerasyonunu gösterir
8. Optimum reaksiyon sıcaklığı 25 ℃'dir ve çok yüksek veya çok düşük sıcaklıklar algılama hassasiyetinde ve OD değerlerinde değişikliklere neden olur.

 

9. Saklama ve son kullanma tarihi

Depolama: 2-8 ℃'de saklayın, dondurmayın.
Son kullanma tarihi: 12 ay;üretim tarihi kutunun üzerindedir.
Not: Mikroplakanın Vakum paketinde sızıntı varsa, kullanım hala geçerlidir, test sonucunu etkilemez, rahat kullanın.

 

 

 

 

 

S1: Ne zaman sevk edilecek?
A1: Ödemeyi aldıktan sonra 7 iş günü içinde malları sizin için mümkün olan en kısa sürede göndeririz.(Salgın gibi dış etkenlerde teslimat gecikebilir)

 

S2: OEM/ODM'yi destekliyor mu?
A2: Desteklenebilir, ancak belirli miktarın, özelleştirilmiş ürünler için uygun olan 100.000'den fazla parça olması gerekir.

 

S3: Fabrikanız kalite kontrol açısından ne durumda?
A3: Ulusal olarak ISO9001 ve ISO13485 sertifikasına sahibiz.Üretim sürecimiz, optimum ürün kalitesini sağlamak için standart prosedürlere uygundur.

 

S4: Satış sonrası hizmet nasıl sağlanır?
A4: Profesyonel çevrimiçi teknik satış sonrası hizmet sunuyoruz.Size video, telefon vb. Yoluyla bire bir rehberlik sağlayabiliriz.

 

Q5: ödeme yöntemi nedir?
A5: T/T ile ödeme alıyoruz.

 

Q6: nasıl gönderilir?
A6: Pek çok işbirlikçi taşıyıcımızdan fiyat teklifi alarak sizin için en iyi nakliye yöntemini seçin ve ayrıca gereksinimlerinize göre gönderin.