Olaquindox ELISA Teşhis Yöntemi Testi Tavuk Domuz Ördeği 96 Kuyu/Kit Duyarlılığı 0,2 Ppb

Olaquindox ELISA Tavuk Domuz Ördek için Test Kiti 96 Kuyu/Kit Hassasiyet 0,2 ppb

1. İlke

Bu test kiti, numunedeki Olaquindox'un tespiti için rekabetçi enzim immünolojik testine dayanmaktadır.Birleştirme antijenleri, mikro-kuyulu şeritler üzerinde önceden kaplanmıştır.Numunedeki Olaquindox ve mikro kuyucuk şeritleri üzerine önceden kaplanmış birleştirme antijenleri, anti-Olaquindox antikoru için rekabet eder.Enzim konjugatının eklenmesinden sonra, renklendirme için TMB substratı eklenir.Numunenin optik yoğunluk (OD) değeri, içindeki Olaquindox ile negatif bir korelasyona sahiptir.Bu değer standart eğri ile karşılaştırılır ve ardından Olaquindox konsantrasyonu elde edilir.

2. Teknik özellikler

Hassasiyet:0,2 ppb
İnkübatör sıcaklığı: 37 ℃
İnkübatör süresi: 30dk~30dk～15dk

Algılama sınırı:
Domuz eti, tavuk 0,2 ppb
Domuz karaciğeri 1 ppb
20 ppb besle

Çapraz reaksiyon oranı:
Olaquindox100%
Karbadoks<%7

Geri Dönüşüm Oranı:
Doku95%±25
Besleme70%±20%

3. Bileşenler

4. Gerekli ancak sağlanmayan malzemeler

1) Ekipmanlar: mikroplaka okuyucu (450nm/630nm), homojenleştirici, osilatör, santrifüj, ölçüm pipetleri, nitrojen kurutma cihazı ve terazi (0.01 g karşılıklı hassasiyet), İnkübatör.
2) Mikropipetörler: tek kanallı 20 ila 200μL ve 100 ila 1000μL ve çok kanallı 30–300μl;
3) Reaktifler: Asetonitril, N-heksan, Al2O3

5. Örnek ön işlem

Talimatlar
Her türlü numunenin ön işleme tabi tutulmasından önce aşağıdaki noktalara dikkat edilmelidir:
1) Deneyler için sadece tek kullanımlık uçlar kullanılabilir ve farklı reaktifleri absorbe etmek için kullanıldığında uçların değiştirilmesi gerekir;
2) Deneyden önce, deney sonuçlarına müdahale eden kontaminasyonu önlemek için her deney aletinin temiz olup olmadığı kontrol edilmeli ve gerekirse tekrar temizlenmelidir.

örnek hazırlama
1) Numune yeniden çözünen çözelti: 1:1 oranında deiyonize su ile 2× konsantre yeniden çözünen çözeltiyi seyreltin

5.1 Dokular (Tavuk, domuz/karaciğer)
1. 2± 0.05 g homojenize numuneyi 50 ml santrifüj tüpüne alın, 10 ml asetonitril (susuz) ekleyin, 2 dakika boyunca uygun şekilde sallayın. Oda sıcaklığında (20 - 25°C) 10 dakika boyunca 4000r/dk'nın üzerinde santrifüjleyin.
2. 5 mL süpernatanı alın, nitrojen veya hava ile 56℃'de üfleyerek kurutun.
3. Kuru tortuyu 2mlN-heksanda çözün, 1 mL seyreltilmiş yeniden çözme solüsyonunu ekleyin, 30 saniye boyunca iyice karıştırın, oda sıcaklığında (20-25°C) 5 dakika boyunca 4000r/dk'nın üzerinde santrifüjleyin.Üst katman N-heksan fazını çıkarın.
4. Analiz için 50 µL alın.
Numunenin seyreltme katı:1

5.2Besleme
1. 1± 0.05 g homojenize numuneyi santrifüj tüpüne tartın, 2gAl2O3, ardından 5mlAsetonitril ekleyin, şiddetle 3dk için sallayın, 4000r/dk'nın üzerinde santrifüjleyin, 25°C'de 5dk;
2. 50ulsupernatant alın, 950ul seyreltilmiş yeniden çözünen solüsyonla eşit şekilde karıştırın, analiz için 50μL üst katman sıvısı alın.
Numunenin seyreltme katı: 100

6. ELISA prosedürleri

6.1 Talimatlar
1) Kullanmadan önce tüm reaktifleri ve mikro kuyulu stripleri oda sıcaklığına (20-25 ℃) getirin;
2) Kullandıktan hemen sonra tüm reaktifleri 2-8℃'ye döndürün;
3) ELISA analizinin tekrarlanabilirliği, büyük ölçüde, plaka yıkamanın kıvamına bağlıdır.ELISA işlemlerinde pleyt yıkamanın doğru yapılması kilit noktadır;
4) Sabit sıcaklıklarda inkübasyon için, tüm numuneler ve reaktifler ışığa maruz kalmamalı ve her mikroplaka kapak membranı ile kapatılmalıdır.

6.2 Çalıştırma Prosedürü
1) Gerekli tüm reaktifleri çıkarın ve en az 30 dakika oda sıcaklığında (20-25 ℃) tutun.Her reaktifin kullanımdan önce çalkalanması ve iyice karıştırılması gerektiğini unutmayın;
2) İstediğiniz mikro kuyucuk şeridini ve plaka çerçevesini alın.Kullanılmayan mikroplakalar tekrar kapatılmalı ve 2-8°C'de saklanmalıdır;
3) Çözelti hazırlama: 40 mL 20x konsantre yıkama tamponunu deiyonize su ile 1:19 oranında (1 kısım 20x konsantre yıkama tamponu + 19 kısım deiyonize su) seyreltin veya gerektiği gibi hazırlayın;
4) Numaralandırma: Mikro kuyuları numunelere ve standart solüsyonlara göre numaralandırın;her numune ve standart çözelti iki kopya halinde yapılmalıdır;konumlarını kaydedin;
5) Ayrı kuyulara 50 µL numune veya standart solüsyon ekleyin ve ardından her kuyuya 50 μL antikor çalışma solüsyonu ekleyin.İyice karıştırmak için hafifçe sallayın, mikroplakayı bir kapak filmi ile örtün ve 37°C'de 30 dakika inkübe edin;
6) Mikroplakayı 250 µL/kuyu yıkama tamponu ile 4-5 kez yıkayın;kuyuları 15-30 saniye boyunca yıkama tamponuna batırın ve emici kağıt ile hafifçe vurarak kurulayın (düşürdükten sonra herhangi bir hava kabarcığı bulunursa, temiz bir pipet ucuyla kesin) );
7) Her kuyucuğa 100 µL Enzim konjugatı ekleyin, çalkalayın ve hafifçe karıştırın, mikroplakayı bir kapak filmi ile örtün ve 37°C'de 30 dakika inkübe edin;kuyudaki sıvıyı boşaltın, mikroplakayı yıkama tamponu ile yıkayın ve 6. adıma devam edin).
8) Renk gelişimi: Her kuyucuğa 50 µL Substrate A solüsyonu ve 50 µL B solüsyonu ekleyin.Hafifçe çalkalayın ve karıştırın ve renk gelişimi için karanlıkta 37°C'de 15 dakika inkübe edin;
9) Test: Her kuyucuğa 50 µL durdurma solüsyonu ekleyin.Karıştırmak için hafifçe sallayın.OD değerini belirlemek için mikroplaka okuyucunun dalga boyunu 450nm'ye ayarlayın.(5 dakika içinde 450/630nm çift dalga boyunda OD değerinin okunması tavsiye edilir).

7. Sonuç kararı

Sonuçları yargılamak için iki yöntem vardır;birincisi kaba bir yargı, ikincisi ise niceliksel belirlemedir.Numunenin OD değerinin Olaquindox içeriği ile negatif bir korelasyona sahip olduğuna dikkat edin.

7.1 Niteliksel belirleme
Konsantrasyon aralığı (ng/mL), numunenin ortalama OD değerinin standart çözeltininkiyle karşılaştırılmasından elde edilebilir.Numunenin OD değerinin 0,3 ve numuneninⅡ değerinin 1,0 olduğunu varsayarsak, standart çözeltilerin değerleri aşağıdaki gibidir: 0ppb için 2.243, 0,2ppb için 1,816, 0,6ppb için 1.415, 1,8ppb için 0,74, 0.313 16.2ppb için 5,4ppb ve 0,155, buna göre numunenin konsantrasyon aralığı Ⅰ5,4 ila 16,2 ppb'dir ve numuneninkiⅡ 0,6 ila 1,8 ppb'dir.

7.2 Nicel belirleme
Absorbans değerlerinin ortalama değerleri, numunenin ve standart solüsyonun ortalama OD değerinin (B) yüzdesine eşittir ve birinci standart solüsyonun (0 standart) OD değerine (B0) bölünür ve ardından %100 ile çarpılır. , yani,

B—örnek veya standart çözeltinin ortalama (çift kuyu) OD değeri
B0—0 ng/mL standart solüsyonun ortalama OD değeri
Standart çözeltilerin absorpsiyon yüzdeleri ve Olaquindox standart çözümlerinin (ng/mL) semilogaritma değerleri ile standart eğriyi sırasıyla Y ve X ekseni olarak çizin.Absorpsiyon yüzdesini standart eğriye dahil ederek standart eğriden numunenin karşılık gelen konsantrasyonunu okuyun.Ortaya çıkan değer daha sonra karşılık gelen seyreltme katıyla çarpılır, böylece nihayet numunede Olaquindox konsantrasyonu elde edilir.
Bu kitin profesyonel analiz yazılımını kullanmak, büyük miktarda numunenin doğru ve hızlı analizi için daha uygun olacaktır.(Bu yazılım için lütfen bizimle iletişime geçin)

8. Önlemler

1. 25 ℃'nin altındaki oda sıcaklığı veya reaktiflerin sıcaklığı ve numunelerin oda sıcaklığına (20-25 ℃) döndürülmemesi, daha düşük bir standart OD değerine yol açacaktır.
2. Mikroplakanın yıkama işlemindeki kuruluğuna lineer olmayan standart eğriler ve istenmeyen tekrarlanabilirlik gibi durumlar eşlik edecektir.
3. Her reaktifi ve reaksiyon karışımını eşit şekilde karıştırın ve mikroplakayı iyice yıkayın, aksi takdirde istenmeyen tekrarlanabilirlik olacaktır.
4. Durdurma solüsyonu 2 M sülfürik asit solüsyonudur, cilt ile temasından kaçının;
5. Kullanılmayan mikroplakayı tekrar kapatmak için otomatik kapanan bir torbaya koyun.Standart madde ve renksiz renk oluşturucu ışığa duyarlıdır ve bu nedenle doğrudan ışığa maruz bırakılamazlar.
6. Son kullanma tarihi geçen kiti kullanmayınız.Kitlerden seyreltilmiş veya katkısız reaktiflerin kullanılması, duyarlılıkta ve OD değerlerinde tespitte değişikliklere yol açacaktır.Kullanmak için farklı lot numaralarına sahip kitlerdeki reaktifleri değiştirmeyin.
7. Bu solüsyonun dejenerasyonunu gösteren herhangi bir renkle renklendirme solüsyonunu atın.0,5'ten küçük 0 standart çözümünün tespit değeri, dejenerasyonunu gösterir.
8. Optimum reaksiyon sıcaklığı 37 ℃'dir ve çok yüksek veya çok düşük sıcaklıklar, algılama hassasiyeti ve OD değerlerinde değişikliklere neden olacaktır.

9. Saklama ve son kullanma tarihi

Depolama: 2-8 ℃'de saklayın, dondurmayın.
Son kullanma tarihi: 12 ay;üretim tarihi kutunun üzerindedir.
Not: Mikroplakanın Vakum paketinde sızıntı varsa, kullanımı hala geçerlidir, test sonucunu etkilemez, kullanmak için rahat olun.

S1: Ne zaman sevk edilecek?
A1: Ödemeyi aldıktan sonra 7 iş günü içinde malları sizin için en kısa sürede göndeririz.(Salgın gibi dış etkenler olması durumunda teslimat gecikebilir)

S2: OEM/ODM'yi destekliyor mu?
A2: Desteklenebilir, ancak belirli miktarın özelleştirilmiş ürünler için uygun olan 100.000 parçadan fazla olması gerekir.

Q3: Fabrikanız kalite kontrol açısından nasıl gidiyor?
A3: Ulusal olarak ISO9001 ve ISO13485 sertifikasına sahibiz.Üretim sürecimiz, optimum ürün kalitesini sağlamak için standart prosedürlere uygundur.

S4: Satış sonrası hizmet nasıl sağlanır?
A4: Profesyonel çevrimiçi teknik satış sonrası hizmet sunuyoruz.Size video, telefon vb. aracılığıyla bire bir rehberlik sağlayabiliriz.

S5: Ödeme yöntemi nedir?
A5: T/T ile ödeme alıyoruz.

S6: Nasıl gönderilir?
A6: Birçok ortak taşıyıcımızdan fiyat teklifi alarak sizin için en iyi nakliye yöntemini seçin ve ayrıca gereksinimlerinize göre gönderin.